Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Xác định Phenytoin và các chuyển hóa chính của nó trong huyết thanh người bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao với phát hiện huỳnh quang
Tóm tắt
Một phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao có phát hiện huỳnh quang có độ nhạy cao đã được phát triển để xác định đồng thời phenytoin và các chuyển hóa chính của nó [5-(3-hydroxyphenyl)-5-phenylhydantoin và 5-(4-hydroxyphenyl)-5-phenylhydantoin]. Sau khi chiết xuất các hợp chất này và 5-(4-methylphenyl)-5-phenylhydantoin (MPPH) làm chuẩn nội từ huyết thanh (50 μl) bằng acetate ethyl, chúng đã được chuyển hóa thành các dẫn xuất huỳnh quang tương ứng thông qua phản ứng với 3-bromomethyl-6,7-dimethoxy-1-methyl-2(1H)-quinoxalinone trong sự hiện diện của potassium hydrogen carbonate và dibenzo-18-crown-6 trong acetonitrile. Các dẫn xuất được phân tách bằng sắc ký đảo pha trên cột YMC-Pack ODS-A với một hỗn hợp acetonitrile–50 mM phosphate buffer (pH 7.0) (4:6, v/v) làm pha di chuyển, và sau đó được phát hiện bằng phổ huỳnh quang ở 448 nm với kích thích ở 365 nm. Giới hạn phát hiện cho phenytoin, 5-(3-hydroxyphenyl)-5-phenylhydantoin và 5-(4-hydroxyphenyl)-5-phenylhydantoin thêm vào huyết thanh lần lượt là 0,6, 3,0 và 0,8 ng (2,4, 11 và 3,1 pmol) ml–1 huyết thanh với tỷ lệ tín hiệu trên nhiễu là ba. Phương pháp này đã được áp dụng để xác định nồng độ phenytoin tự do và tổng cộng cũng như các mức độ chuyển hóa trong huyết thanh thu được từ hai tình nguyện viên khỏe mạnh, sau khi dùng thuốc bằng đường miệng.
Từ khóa
#Phenytoin #sắc ký lỏng hiệu năng cao #phát hiện huỳnh quang #chuyển hóa #huyết thanhTài liệu tham khảo
T. J. Putman and H. H. Merritt, Science [Washington, D.C.], 85, 525 (1937).
G. F. Ayala and D. Johnston, Epilepsia, 18, 299 (1977).
H. Kutt, W. Winters, R. Kokenge and F. McDowell, Arch. Neurol., 11, 642 (1964).
L. Lund, Arch. Neurol., 31, 289 (1974).
A. L. Finn, “Applied Clinical Pharmacokinetics”, ed. D. R. Mungall, p. 103, Raven Press, New York, 1983.
E. D. Burgess, P. N. Friel, A. D. Blair and V. A. Raisys, Ann. Intern. Med., 94, 59 (1981).
M. A. Sirgo, P. J. Green, M. L. Rocci and P. H. Vlasses, Neurology, 34, 1250 (1984).
W. L. Roberts and P. M. Rainey, Clin. Chem., 39, 1872 (1993).
R. J. Sawchuk and G. R. Matzke, Ther. Drug Monit., 6, 97 (1984).
S. J. Rainbow, C. M. Dawson and T. R. Tickner, J. Chromatogr., 527, 389 (1990).
H. Liu, M. Delgado, L. J. Forman, C. M. Eggers and J. L. Montoya, J. Chromatogr., 616, 105 (1993).
M. Yamaguchi, S. Hara, R. Matsunaga, M. Nakamura and Y. Ohkura, J. Chromatogr., 346, 227 (1985).
M. Yamaguchi, R. Matsunaga, S. Hara, M. Nakamura and Y. Ohkura, J. Chromatogr., 375, 27 (1986).
M. Yamaguchi, K. Fukuda, S. Hara, M. Nakamura and Y. Ohkura, J. Chromatogr., 380, 257 (1986).
M. Yamaguchi, M. Nakamura, N. Kuroda and Y. Ohkura, Anal. Sci., 3, 75 (1987).
M. Iwamoto, S. Yoshida and S. Hirose, J. Chromatogr., 310, 151 (1984).
J. C. Argyle, D. W. Kinniburgh, R. Costa and T. Jennison, Ther. Drug Monit., 6, 117 (1984).
A. J. Glazko, Epilepsia, 16, 367 (1975).
T. IShizaki, H. Chiba, K. Mamada and M. Yoshioka, Jpn. J. Clin. Psy., 7, 283 (1978).