Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Phát hiện tiêm EPO bằng phương pháp thử nghiệm isoform nhanh kiểu dòng chảy ngang
Tóm tắt
Việc lạm dụng erythropoietin tái tổ hợp người (rhEPO) là một mối quan tâm lớn trong thể thao cạnh tranh, do đó cần thiết phải triển khai các phương pháp thử nghiệm cho phép phát hiện với tỷ lệ cao hơn so với các thử nghiệm hiện tại. Trong nghiên cứu này, bộ thử nghiệm isoform EPO dòng chảy ngang mới, EPO WGA MAIIA, được đánh giá dựa trên mẫu huyết tương và nước tiểu thu được từ tám nam giới khỏe mạnh trong thời gian 28 ngày tiêm rhEPO. rhEPO được tiêm mỗi ngày một lần trong 14 ngày đầu của nghiên cứu, và phương pháp này đã chứng minh hiệu quả 100% trong việc phát hiện rhEPO trong các mẫu thu được. Bảy ngày sau lần tiêm cuối cùng, ba đối tượng dương tính (>99,99% giới hạn độ tin cậy (CL)) đã được phát hiện. Khi sử dụng 99% CL làm giới hạn cắt, sáu trong số tám đối tượng (75%) bị nghi ngờ doping. Các mẫu thu được 14 và 21 ngày sau lần tiêm cuối cùng không cho thấy dấu vết nào của rhEPO. Một nghiên cứu trước đó sử dụng phương pháp gián tiếp để xác định doping EPO trên cùng các mẫu chỉ ra rằng chỉ có hai trong số các đối tượng có giá trị nghi ngờ từ 7–21 ngày sau lần tiêm cuối cùng. Chúng tôi đề xuất triển khai thử nghiệm EPO WGA MAIIA dễ sử dụng này như một quy trình sàng lọc ban đầu trong công tác chống doping nhằm (1) nâng cao tỷ lệ phát hiện vận động viên nghi ngờ dùng rhEPO và (2) cho phép tỷ lệ phân tích cao gấp 10 đến 20 lần so với những gì có thể thực hiện hiện nay.
Từ khóa
#EPO #lạm dụng #thể thao #doping #xét nghiệm.Tài liệu tham khảo
Lundby C, Robach P, Saltin B (2012) The evolving science of detection of 'blood doping'. Br J Pharmacol 165(5):1306–1315
Barroso O, Mazzoni I, Rabin O (2008) Hormone abuse in sports: the antidoping perspective. Asian J Androl 10(3):391–402
Lundby C, Robach P, Boushel R, Thomsen JJ, Rasmussen P, Koskolou M, Calbet JA (2008) Does recombinant human EPO increase exercise capacity by means other than augmenting oxygen transport? J Appl Physiol 105(2):581–587
Halstenson CE, Macres M, Katz SA, Schnieders JR, Watanabe M, Sobota JT, Abraham PA (1991) Comparative pharmacokinetics and pharmacodynamics of epoetin alfa and epoetin beta. Clin Pharmacol Ther 50(6):702–712
Dou P, Liu Z, He J, Xu JJ, Chen HY (2008) Rapid and high-resolution glycoform profiling of recombinant human erythropoietin by capillary isoelectric focusing with whole column imaging detection. J Chromatogr 1190(1–2):372–376
Wang H, Dou P, Lu C, Liu Z (2012) Immuno-magnetic beads-based extraction-capillary zone electrophoresis-deep UV laser-induced fluorescence analysis of erythropoietin. J Chromatogr 1246:48–54
Wide L, Bengtsson C (1990) Molecular charge heterogeneity of human serum erythropoietin. Br J Haematol 76(1):121–127
Wide L, Bengtsson C, Berglund B, Ekblom B (1995) Detection in blood and urine of recombinant erythropoietin administered to healthy men. Med Sci Sports Exerc 27(11):1569–1576
Lasne F, Martin L, Crepin N, de Ceaurriz J (2002) Detection of isoelectric profiles of erythropoietin in urine: differentiation of natural and administered recombinant hormones. Anal Biochem 311(2):119–126
Kohler M, Ayotte C, Desharnais P, Flenker U, Lüdke S, Thevis M, Völker-Schänzer E, Schänzer W (2008) Discrimination of recombinant and endogenous urinary erythropoietin by calculating relative mobility values from SDS gels. Int J Sports Med 29(01):1–6
Reichel C, Kulovics R, Jordan V, Watzinger M, Geisendorfer T (2009) SDS-PAGE of recombinant and endogenous erythropoietins: benefits and limitations of the method for application in doping control. Drug Test Anal 1(1):43–50
Franco Fraguas L, Carlsson J, Lönnberg M (2008) Lectin affinity chromatography as a tool to differentiate endogenous and recombinant erythropoietins. J Chromatogr 1212(1–2):82–88
Lönnberg M, Andren M, Birgegard G, Drevin M, Garle M, Carlsson J (2012) Rapid detection of erythropoiesis-stimulating agents in urine and serum. Anal Biochem 420:101–114
Reichel C (2011) Recent developments in doping testing for erythropoietin. Anal Bioanal Chem 401(2):463–481
Dehnes Y, Lamon S, Lonnberg M (2010) Erythropoietin (EPO) immunoaffinity columns—a powerful tool for purifying EPO and its recombinant analogues. J Pharm Biomed Anal 53(4):1028–1032
Lönnberg M, Dehnes Y, Drevin M, Garle M, Lamon S, Leuenberger N, Quach T, Carlsson J (2010) Rapid affinity purification of erythropoietin from biological samples using disposable monoliths. J Chromatogr 1217(45):7031–7037
Lonnberg M, Bondesson U, Cormant F, Garcia P, Bonnaire Y, Carlsson J, Popot MA, Rollborn N, Rasbo K, Bailly-Chouriberry L (2012) Detection of recombinant human EPO administered to horses using MAIIA lateral flow isoform test. Anal Bioanal Chem 403(6):1619–1628
Ashenden M, Sharpe K, Garnham A, Gore CJ (2012) Evaluation of the MAIIA dipstick test to detect recombinant human erythropoietin in plasma. J Pharm Biomed Anal 67–68:123–128
Lundby C, Achman-Andersen NJ, Thomsen JJ, Norgaard AM, Robach P (2008) Testing for recombinant human erythropoietin in urine: problems associated with current anti-doping testing. J Appl Physiol 105(2):417–419
Lasne F, Martin L, Martin JA, de Ceaurriz J (2007) Isoelectric profiles of human erythropoietin are different in serum and urine. Int J Biol Macromol 41(3):354–357
Lamon S, Robinson N, Sottas P-E, Henry H, Kamber M, Mangin P, Saugy M (2007) Possible origins of undetectable EPO in urine samples. Clin Chim Acta 385(1–2):61–66
Lamon S, Martin L, Robinson N, Saugy M, Ceaurriz J, Lasne F (2009) Effects of exercise on the isoelectric patterns of erythropoietin. Clin J Sport Med 19(4):311–315
Beullens M, Delanghe JR, Bollen M (2006) False-positive detection of recombinant human erythropoietin in urine following strenuous physical exercise. Blood 107(12):4711–4713
Jelkmann W (2007) Novel erythropoietic agents: a threat to sportsmanship. Medicina Sportiva 11(2):32–42
Lönnberg M, Drevin M, Carlsson J (2008) Ultra-sensitive immunochromatographic assay for quantitative determination of erythropoietin. J Immunol Methods 339(2):236–244
Zorzoli M (2005) Blood monitoring in anti-doping setting. Recent Adv Doping Anal 13:255–264
Sharpe K, Ashenden MJ, Schumacher YO (2006) A third generation approach to detect erythropoietin abuse in athletes. Haematologica 91(3):356–363
Borno A, Aachmann-Andersen NJ, Munch-Andersen T, Hulston CJ, Lundby C (2010) Screening for recombinant human erythropoietin using [Hb], reticulocytes, the OFF(hr score), OFF(z score) and Hb(z score): status of the Blood Passport. Eur J Appl Physiol 109(3):537–543
Franz SE (2009) Erythropoiesis-stimulating agents: development, detection and dangers. Drug Test Anal 1(6):245–249
Macdougall IC, Ashenden M (2009) Current and upcoming erythropoiesis-stimulating agents, iron products, and other novel anemia medications. Adv Chronic Kidney Dis 16(2):117–130
Dehnes Y, Hemmersbach P (2011) Effect of single doses of methoxypolyethylene glycol-epoetin beta (CERA, Mircera) and epoetin delta (Dynepo) on isoelectric erythropoietin profiles and haematological parameters. Drug Test Anal 3(5):291–299
