Sự phát triển của các dòng tế bào và khối u sản xuất kháng thể đặc hiệu qua kỹ thuật hợp nhất tế bào

Các kỹ thuật hợp nhất tế bào đã được sử dụng để tạo ra các dòng tế bào lai giữa tế bào u tủy và tế bào sản xuất kháng thể. Các dòng lai thu được đã thích nghi vĩnh viễn để phát triển trong nuôi cấy mô và có khả năng gây ra các khối u sản xuất kháng thể ở chuột.

Lách từ chuột được miễn dịch với tế bào máu đỏ cừu (SRBC) đã được hợp nhất với một dòng tế bào 8-azaguanine kháng (X63-Ag8) của u tủy MOPC 21. Hơn 50% các dòng lai thu được sản xuất và tiết ra các immunoglobulin khác với u tủy MOPC 21. Khoảng 10% các dòng lai thể hiện hoạt tính chống SRBC. Tỷ lệ cao của các tế bào lai sản xuất kháng thể cho thấy rằng quá trình hợp nhất liên quan đến một phần giới hạn của quần thể tế bào lách, có khả năng là các tế bào đã cam kết sản xuất kháng thể.

Để tránh sự hiện diện của chuỗi nặng MOPC 21 trong các dòng lai đặc hiệu, một dòng tế bào u tủy khác (NSI/1-Ag4–1) đã được sử dụng. Đây là một biến thể không tiết của u tủy MOPC 21 mà không biểu hiện các chuỗi nặng.

Ba dòng lai sản xuất kháng thể chống SRBC (có thể thuộc các lớp μ, γ_2b và γ₁, tương ứng) và hai dòng lai sản xuất kháng thể chống 2,4,6-trinitrophenyl (thuộc lớp μ) đã được nhân giống nhiều lần. Thông qua việc lựa chọn ngẫu nhiên và lựa chọn các dòng đặc hiệu dựa trên hoạt tính ly giải của chúng (lựa chọn mảng dòng), một số dòng khác nhau đã được xây dựng. Các dòng này thể hiện các sự kết hợp khác nhau của bốn chuỗi có thể có của mỗi dòng lai: các chuỗi γ và k từ u tủy và các chuỗi kháng thể nặng và nhẹ đặc hiệu. Trong ba trường hợp (Sp1, Sp2 và Sp7) cho thấy rằng chỉ có sự kết hợp chuỗi nặng và nhẹ đặc hiệu có hoạt tính và rằng các chuỗi từ u tủy không thể thay thế cho chúng. Trong hầu hết các trường hợp, các dòng đã được thu được không còn biểu hiện các chuỗi MOPC 21 nữa mà chỉ biểu hiện các chuỗi kháng thể đặc hiệu.