Chiết Xuất DNA, RNA và Protein: Quá Khứ và Hiện Tại

BioMed Research International - Tập 2009 Số 1 - 2009
Siun Chee Tan1, Beow Chin Yiap2
1School of Postgraduate Studies & Research, Division of Pharmacy, International Medical University, No. 126, Jalan 19/155B, Bukit Jalil, 57000 Kuala Lumpur, Malaysia
2School of Pharmacy and Health Science, Division of Pharmacy, International Medical University, No. 126, Jalan 19/155B, Bukit Jalil, 57000 Kuala Lumpur, Malaysia

Tóm tắt

Chiết xuất DNA, RNA và protein là phương pháp cơ bản được sử dụng trong sinh học phân tử. Những sinh học phân tử này có thể được tách ra từ bất kỳ vật liệu sinh học nào để phục vụ cho các quy trình tiếp theo, phân tích hoặc chuẩn bị. Trong quá khứ, quy trình chiết xuất và tinh chế axit nucleic thường phức tạp, tốn thời gian, cần nhiều công sức và hạn chế về thông lượng tổng thể. Hiện nay, có nhiều phương pháp chuyên biệt có thể được sử dụng để chiết xuất sinh học phân tử tinh khiết, chẳng hạn như các giao thức dựa trên dung dịch và cột. Phương pháp thủ công chắc chắn đã tiến xa theo thời gian với nhiều sản phẩm thương mại bao gồm các bộ kit hoàn chỉnh chứa hầu hết các thành phần cần thiết để tách axit nucleic, nhưng hầu hết đều yêu cầu các bước ly tâm lặp đi lặp lại, tiếp theo là loại bỏ phần dịch nổi tùy thuộc vào loại mẫu và các điều trị cơ khí bổ sung. Các hệ thống tự động được thiết kế cho các phòng thí nghiệm cỡ trung bình đến lớn đã gia tăng nhu cầu trong những năm gần đây. Đây là một lựa chọn thay thế cho các phương pháp thủ công tốn công sức. Công nghệ này phải cho phép thông lượng mẫu cao; năng suất, độ tinh khiết, khả năng tái lập và khả năng mở rộng của các sinh học phân tử cũng như tốc độ, độ chính xác và độ tin cậy của phép thử nên tối đa, đồng thời giảm thiểu rủi ro ô nhiễm chéo.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

Wink M., 2006, An Introduction to Molecular Biotechnology: Molecular Fundamentals, Methods and Application in Modern Biotechnology

Doyle K., 1996, The Source of Discovery: Protocols and Applications Guide

Buckingham L., 2007, Molecular Diagnostics: Fundamentals, Methods, & Clinical Applications

Cseke L. J., 2004, Handbook of Molecular and Cellular Methods in Biology and Medicine

Brooks G., 1998, Biotechnology in Healthcare: An Introduction to Biopharmaceuticals

KojimaK.andOzawaS. Method for isolating and purifying nucleic acids United State patent US 2002/0192667 A1 December 2002.

Watson J. D., 2004, Molecular Biology of the Gene

Dahm R., 2004, Friedrich Miescher and the Discovery of DNA

Whitford D., 2005, Proteins: Structure and Function

Edsall J. T., 1961, Biographical Memoirs, 47

SmarasonS. V.andSmithA. V. Method for desalting nucleic acids United State patent US 2003/0186247 A1 deCODE genetics ehf. October 2003.

Sambrook J., 2001, Molecular Cloning: A Laboratory Manual

10.1038/nprot.2006.83

10.1093/nar/7.6.1513

Sambrook J., 2001, Molecular Cloning: A Laboratory Manual

10.2144/05392AF01

Gjerse D. T., 2009, RNA Purification and Analysis: Sample Preparation, Extraction, Chromatography

SmithC. E. HolmesD. L. SimpsonD. J. KayzhendlerJ. BitnerR. H. andGrosehJ. C. Mixed-bed solid phase and its use in the isolation of nucleic acids United State patent US 2002/0001812 A1 Promega Corporation January 2002.

PadhyeV. V. YorkC. andBurkiewiezA. Nucleic acid purification on silica gel and glass mixture United States patent US 5658548 Promega Corporation August 1997.

WoodardD. L. HowardA. J. andDownJ. A. Process for purifying DNA on hydrated silica United State patent US 5342931 Becton Dickinson and Company August 1994.

10.1038/nmeth845

Department of Biology Davidson College Geneclean ® http://www.bio.davidson.edu/courses/Molbio/MolStudents/spring99/lauren/geneclean.html.

ArnoldT. E. MeyeringM. T. andChestersonR. S. Nucleic acid binding matrix United States patent US 6869532 B2 CUNO Incorporated March 2005.

Dederich D. A., 2002, Glass bead purification of plasmid template DNA for high throughput sequencing of mammalian genomes, Nucleic Acids Research, 30, 10.1093/nar/30.7.e32

LittleM. C. Process for the purification of DNA on diatomaceous earth United States patent US 5075430 Bio-Rad Laboratories Inc. December 1991.

10.1007/s00253‐006‐0675‐0

NargessiR. D. Magnetic isolation and purification of nucleic acids United States patent US 6855499 B1 Cortex Biochem Inc. February 2005.

Bio-Nobile Oy, 2003, QuickPickTM Plasmid DNA

QIAGEN Inc., 2008, QAsymphony ® DNA Handbook

Applied Biosystems, 2008, MagMAXTM Total Nucleic Acid Isolation Kit

Beckman Coulter, Inc., 2009, Agencourt ® AMPure ® System: PCR Purification System

BIOMOL GmbH, 2004, ArrayGrade mRNA Purification Kit User Manual

Thermo Scientific Inc., 2007, Pierce Strong Ion Exchange Spin Columns

QIAGEN Inc., 2001, QIAGEN Genomic DNA Handbook

SelingsonD. B.andShrawderE. J. Method of isolating and purifying nucleic acids from biological samples United State patent US 4935342 Syngene Inc. June 1990.

QIAGEN Inc., 2006, QproteomeTM Mammalian Protein Preparation Handbook

Fido R. J., 2004, Protein extraction from plant tissues, Methods in Molecular Biology, 244, 21

Wheelwright S. M., 1991, Protein Purification: Design and Scale up of Downstream Processing

Gene Research Lab, 2007, Gel Filtration Buffer Kit

Bangalore Genei, 2007, GeNeiTM Gel Filtration Chromatography Teaching Kit Manual

Amersham Biosciences, 2002, Affinity Chromatography; Principles and Methods

Thermo Scientific Inc., 2008, Pack Beaded Affinity Resin into Columns

Karp G., 2008, Cell and Molecular Biology: Concepts and Equipments

10.1093/nar/8.1.1

Handen J. S., 1997, An improved method for southwestern blotting, Frountiers in Bioscience, 2, 9, 10.2741/A166

QIAGEN Inc., 2007, AllPrep ® DNA/RNA/Protein Mini Handbook

DeRiPRO DNA RNA and Proteins Extraction Technology PCT/MY2008/000059 http://terra%2Dju.com/TLS.htm.

Promega Corporation, 2008, Personal AutomationTM for Workflow Optimization in the Clinical Lab [pamphlet]

Loeffler J., 2004, Automated nucleic acid extraction, Encyclopedia of Genomics and Proteomics, 93, 10.3109/9780203997352.019

10.1126/science.295.5554.517

WatkinsG. Automated DNA extraction http://www.ngrl.org.uk/Wessex/extraction.htm.

Promega Corporation, 2006, Maxwell ® 16: Personal AutomationTM from Promega

Analytik Jena AG, 2007, InnuPure C12 Extraction System

SadaranganiD. MacDonaldB. RodrigoA. G. andSaulD. DNA analysis using a portable robotic instrument http://www.ele.auckland.ac.nz/~macdon/general/files/acra03‐dsbmards.pdf.

ThomsinA. Insights into lab automation′s future IVD Technology January 2007.