Điều kiện ảnh hưởng đến việc duy trì lâu dài mô đại tràng chuột và chuột cống trong văn hóa cơ quan

Betti Reiss1, Gary M. Williams1
1Naylor Dana Institute for Disease Prevention, American Health Foundation, Valhalla

Tóm tắt

Nghiên cứu này tập trung vào tác động của sự biến đổi trong điều kiện nuôi cấy đối với khả năng sống sót của các mảnh đại tràng xuống của chuột và chuột cống trong môi trường nuôi cấy cơ quan thông qua các tiêu chí hình thái và chức năng. Một tổ hợp các điều kiện được chứng minh là có lợi cho phép duy trì ít nhất trong 35 ngày. Các điều kiện này bao gồm: môi trường khí 95% O2 và 5% CO2, một ma trận gắn kết bao gồm màng Metricel GA-4 (kích thước lỗ, 0.8 μm), tiếp xúc gián đoạn với các pha khí và lỏng bằng cách lắc trong 5 ml môi trường và bổ sung môi trường với 1.0 μM dexamethasone và 10% FBS. Trong thời gian này, cấu trúc tinh thể của biểu mô niêm mạc đã được bảo tồn tốt, và quá trình tổng hợp DNA trong các tinh thể và sản xuất mucin trong các tinh thể và biểu mô bề mặt diễn ra liên tục. Thêm vào đó, hormone tổng hợp pentagastrin đã kích thích quá trình tổng hợp DNA trong biểu mô niêm mạc của mẫu đại tràng chuột trong môi trường nuôi cấy cơ quan ngắn hạn.

Từ khóa

#đại tràng #nuôi cấy cơ quan #điều kiện nuôi cấy #cấu trúc biểu mô #tổng hợp DNA #hormone tổng hợp

Tài liệu tham khảo

Browning, T. H., and T. S. Trier. 1969. Organ culture of mucosal biopsies of human small intestine. J. Clin. Invest. 48: 1423–1432. DeRitis, G., Z. M. Falchuk, and J. S. Trier. 1975. Differentiation and maturation of culture fetal rat jejunum. Dev. Biol. 45: 304–317. Dobbins, W. O., J. C. Hijmans, and K. S. McCarthy. 1967. A light and electron microscopic study of duodenal epithelium of chick embryos cultured in the presence and absence of hydrocortisone. Gastroenterology 53: 557–574. Hijmans, J. C. 1972. Effect of colchicine and hydrocortisone on invertase activity in the duodenum of the chick embryo. Gastroenterology 63: 279–287. Kagnoff, N. F., R. M. Donaldson, and J. S. Trier. 1972. Organ culture of rabbit small intestine: prolongedin vitro steady state protein synthesis and secretion and secretory IgA secretion. Gastroenterology 63: 541–551. Kedinger, M., K. Haffen, and J. S. Hugon. 1974. Organ culture of adult guinea pig intestine I. Ultrastructural aspect after 24 and 48 hours in culture. Z. Zellforsch. Mikrosk. Anat. 147: 169–181. Moog, F., and M. H. Kirsch. 1955. Quantitative determination of phosphatase activity in chick embryo duodenum cultured in fluid media with and without hydrocortisone. Nature 175: 722–723. Autrup, H., L. A. Barrett, F. E. Jackson, M. L. Jesudason, G. Stoner, P. Phelps, B. F. Trump, and C. C. Harris. 1978. Explant culture of human colon. Gastroenterology 74: 1248–1257. Autrup, H., C. C. Harris, B. F. Trump, and A. M. Jeffrey. 1978. Metabolism of benzo(a)pyrene and identification of the major benzo(a) pyrene-DNA adducts in cultured human colon. Cancer Res. 38: 3689–3696. Autrup, H., G. D. Stoner, F. Jackson, C. C. Harris, A. K. M. Shamsuddin, L. A. Barrett, and B. F. Trump. 1978. Explant culture of rat colon: A model system for studying metabolism of chemical carcinogens. In Vitro 14:868–877. Breborowicz, J., G. C. Easty, M. Birbeck, D. Robertson, R. Nery, and A. M. Neville. 1975. The monolayer and organ culture of human colorectal carcinomata and the associated “normal” colonic mucosa and their production of carcinoembryonic antigens. Br. J. Cancer 31: 559–569. Defries, E. A., and L. M. Franks. 1977. An organ culture method for adult colon from germfree and conventional mice: Effects of donor age and carcinogen treatment on epithelial mitotic activity. J. natl. Cancer Inst. 58: 1323–1328. Hayashi, T., R. Yatani, J. Apostol, and G. N. Stemmermann. 1974. Pathogenesis of hyperplastic polyps of the colon: an hypothesis based on ultrastructure andin vitro cell kinetics. Gastroenterology 66: 347–357. Schiff, L. J. 1975. Organ culture of rat and hamster colon. In Vitro 11: 46–49. Johansen, P. G. 1970. Anin vitro system for studying mucous secretion and other physiological activity in human intestinal mucosa. Experientia 26: 130–131. Eastwood, G. L., and J. S. Trier 1973. Organ culture of human rectal mucosa. Gastroenterology 64: 375–382. Reiss, B., and G. M. Williams. 1977. Maintenance of mouse colon epithelium in organ culture. (abstr.) In Vitro 13: 202. Trump, B. F., E. M. McDowell, L. A. Barret, A. L. Frank, and C. C. Harris. 1974. Studies of ultrastructure, cytochemistry and organ culture of human bronchial epithelium. In: E. Karbe, and J. F. Parks (Eds.),Experimental Lung Cancer Carcinogenesis and Bioassays Springer-Verlag, New York, pp. 548–563. Mak, K. M., and W. W. L. Chang 1976. Pentagastrin-stimulated epithelial cell proliferation in duodenal and colonic crypts in fasted rats. Gastroenterology 71: 1117–1120. Williams, G. M., and J. M. Grunn. 1974. Long-term cell culture of adult rat liver epithelial cells. Expt. Cell Res. 89: 139–142. Liddle, G. W., and K. L. Melmen. 1974. The adrenals. In: R. H. Williams (Ed.)Textbook of Endocrinology, 5th Ed.. W. B. Saunders and Co., Philadelphia, pp. 233–322. DeLuca, L., E. P. Little, and G. Wolf. 1969. Vitamin A and protein synthesis by rat intestinal mucosa. J. Biol. Chem. 244: 701–708. Johnson, L. R. 1977. Gastrointestinal hormones and their functions. Annu. Rev. Physiol. 39: 135–158. Chang, W. W. L., and C. P. LeBlond. 1971. Renewal of the epithelium in the descending colon of the mouse. I. Presence of three cell populations: vacuolated-columnar, mucous and argentaffin. Am. J. Anat. 131: 73–100. Abrams, G. D., H. Bauer, and H. Spring. 1963. Influence of the normal flora on mucosal morphology and cellular renewal in the ileum. A comparison of germ-free and conventional mice. Lab. Invest. 12: 355–364. Lesher, S., H. E. Walburg, and G. A. Sacher. 1964. Generation cycle in the duodenal crypt cells of germ-free and conventional mice. Nature 202: 884–886. Dobbins, W. O., B. A. Herrero, and C. M. Mansbach. 1968. Morphologic alterations associated with neomycin-induced malabsorption. Am. J. Med. Sci. 255: 63–77. Laishes, B. A., and G. M. Williams. 1976. Conditions affecting primary cell cultures of functional adult rat hepatocytes. II. Dexamethasone-enhanced longevity and maintenance of morphology. In Vitro 12: 821–832. Williams, G. M., E. Bermudez, R. H. C. San, P. J. Goldblatt, and M. F. Laspia. 1978. Rat hepatocyte primary cultures. IV. Maintenance in defined medium and the role of production of plasminogen activator and other proteases. In Vitro 14: 824–837. Reese, D. H., R. D. Friedman, and M. B. Sporn. 1977. Induction of hyperplasia and its suppression by hydrocortisone in organ-cultured rat urinary bladder. Cancer Res. 37: 1421–1427. Lichtenberger, L., L. R. Miller, D. N. Erwin, and L. R. Johnson. 1973. Effect of pentagastrin on adult rat duodenal cells in culture. Gastroenterology 65: 242–251.