Miền Coiled-Coil của Protein EspD được Tiết Ra Thông Qua Kiểu III của Escherichia coli Gây Bệnh Đường Ruột Liên Quan Đến Sự Gắn Kết Tế Bào và Tình Trạng Tan Máu của EspA

Nhiều mầm bệnh động vật và thực vật sử dụng hệ thống tiết loại III để tiết ra các yếu tố độc lực then chốt, một số được đưa trực tiếp vào lòng tế bào của vật chủ. Tuy nhiên, cơ sở cho việc di chuyển protein như vậy vẫn chưa được làm sáng tỏ hoàn toàn đối với bất kỳ hệ thống tiết loại III nào. Chúng tôi đã chỉ ra rằng trong các chủng Escherichia coli gây bệnh đường ruột và gây tiêu chảy có máu, protein được tiết ra qua loại III là EspA được lắp ráp thành một bào quan hình sợi bện, gắn kết vi khuẩn vào màng tế bào của vật chủ. Sự hình thành các sợi EspA phụ thuộc vào việc biểu hiện một protein được tiết ra khác theo kiểu III, EspD. Phần cuối carboxy của EspD, một protein tham gia vào việc tạo ra lỗ di chuyển trong màng tế bào của vật chủ, được dự đoán sẽ có dạng xoắn với xác suất lên tới 99%. Tại đây, chúng tôi chứng minh sự tương tác giữa các protein EspD-EspD bằng cách sử dụng hệ thống hai-hybrid nấm men và các lớp cột. Sự thay thế axit amin ba không bảo toàn của các khu vực đặc biệt ở tận cùng carboxy của EspD đã tạo ra một đột biến ở E. coli gây bệnh đường ruột bị giảm khả năng kích thích tạo ra tổn thương gắn kết và tẩy tế bào trên các tế bào HEp-2. Mặc dù đột biến này không ảnh hưởng đến sự tổng hợp sợi EspA, nhưng nó cũng dẫn đến việc giảm gắn kết và giảm tình trạng tan máu của các tế bào hồng cầu. Những kết quả này phân lập, lần đầu tiên, các miền chức năng của EspD điều khiển chiều dài sợi EspA khỏi sự gắn kết tế bào do EspD điều phối và việc hình thành lỗ.