Phân loại và xác định vi khuẩn cầu màu có liên quan đến môi trường đất thông qua quang phổ Raman

Springer Science and Business Media LLC - Tập 22 - Trang 19317-19325 - 2015
Vinay Kumar1,2, Bernd Kampe1,2, Petra Rösch1,2, Jürgen Popp1,3,2
1Institute of Physical Chemistry and Abbe Center of Photonics, Friedrich Schiller University Jena, Jena, Germany
2Infectognostics, Forschungscampus Jena, Jena, Germany
3Leibniz Institute of Photonic Technology, Jena, Germany

Tóm tắt

Một môi trường đất chứa một số lượng đáng kể vi khuẩn mà không thể nuôi cấy bằng các phương pháp thông thường, điều này đã gây ra những khó khăn rõ rệt trong việc phân loại và xác định chúng. Khó khăn này tạo ra nhu cầu cần thiết về các kỹ thuật tiên tiến, trong đó một cơ sở dữ liệu sinh phân tử được biên soạn tốt gồm các loại vi khuẩn đã có thể nuôi cấy có thể được sử dụng làm tham khảo nhằm liên kết các vi khuẩn không nuôi cấy tới các nhóm phát sinh gần nhất của chúng. Quang phổ Raman đã được áp dụng thành công trong các nghiên cứu phân loại của nhiều hệ thống như vi khuẩn, nấm và thực vật, dựa vào sự khác biệt về quang phổ do sự thay đổi trong thành phần sinh phân tử tổng thể của chúng. Tuy nhiên, những sự khác biệt này có thể bị che khuất bởi các dấu hiệu Raman từ các sắc tố vi sinh vật nhạy sáng như carotenoid, vốn cho thấy sự biến đổi lớn trong cường độ tín hiệu, cản trở việc điều tra phân loại. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã áp dụng phương pháp tẩy màu do laser để loại bỏ các dấu hiệu carotenoid từ vi khuẩn cầu có sắc tố. Sử dụng phương pháp này, chúng tôi đã điều tra 12 loài vi khuẩn màu sắc phổ biến trong môi trường đất thuộc ba chi chính là Micrococcus, Deinococcus và Kocuria dựa trên quang phổ Raman của chúng với sự hỗ trợ của một công cụ hóa định lượng được gọi là máy vector hỗ trợ (SVM) hạt hướng tâm. Kết quả của chúng tôi cho thấy tiềm năng của quang phổ Raman như một công cụ phân loại ít xâm lấn để xác định vi khuẩn cầu màu trong đất ở cấp độ đơn bào.

Từ khóa

#quang phổ Raman #phân loại vi khuẩn #vi khuẩn cầu màu #sinh phân tử #vi sinh vật đất

Tài liệu tham khảo

Baranska M, Schulz H, Kruger H, Quilitzsch R (2005) Chemotaxonomy of aromatic plants of the genus Origanum via vibrational spectroscopy. Anal Bioanal Chem 381:1241–1247 Baranski R, Baranska M, Schulz H, Simon PW, Nothnagel T (2006) Single seed Raman measurements allow taxonomical discrimination of Apiaceae accessions collected in gene banks. Biopolymers 81:497–505 Bocklitz T, Walter A, Hartmann K, Rösch P, Popp J (2011) How to pre-process Raman spectra for reliable and stable models. Anal Chim Acta 704:47–56 Boser BE, Guyon IM, Vapnik V (1992) A training algorithm for optimal margin classifiers. Proc Fifth Ann Workshop Comput Learn Theory 144–152 Britton G (1995) Structure and properties of carotenoids in relation to function. FASEB 9:1551–1558 Britton G, Liaaen Jensen S, Pfander H (2008) Carotenoids volume 4: natural functions. Springer, Germany Burges CJC (1998) A tutorial on support vector machines for pattern recognition. Data Min Knowl Disc 2(2):121–167 Chan JW et al (2006) Micro-Raman spectroscopy detects individual neoplastic and normal hematopoietic cells. Biophys J 90:648–656 Cheng WT, Liu MT, Liu HN, Lin SY (2005) Micro Raman spectroscopy used to identify and grade human skin pilomatrixoma. Microsc Res Tech 68:75–79 Collins AM et al (2011) Carotenoid distribution in Living cells of Haematococcus pluvialis (Chlorophyceae). PLoS One 6(9) Cortes C, Vapnik V (1995) Support-vector networks. Mach Learn 20(3):273–297 Dochow S et al (2011) Tumour cell identification by means of Raman spectroscopy in combination with optical traps and microfluidic environments. Lab Chip 11:1484–1490 Frank CJ, McCreecy RL, Redd DCB (1995) Raman spectroscopy of normal and diseased human breast tissues. Anal Chem 67:777–783 Harz M, Rösch P, Popp J (2009) Vibrational spectroscopy a powerful tool for the rapid identification of microbial cells at the single cell level. Cytometry A 75(2):104–13 Huang Z, McWilliams A, Lui M, McLean DI, Lam S, Zeng H (2003) Near-infrared Raman spectroscopy for optical diagnosis of lung cancer. Int J Cancer 107:1047–1052 Ji H-F (2010) Insight into the strong antioxidant activity of Deinoxanthin, a unique carotenoid in Deinococcus radiodurans. Int J Mol Sci 11:4506–4510 Janda JM, Abbott SL (2007) 16S rRNA gene sequencing for bacterial identification in the diagnostic laboratory: pluses, perils, and pitfalls. J Clin Microbiol 45:2761–2764 Janssen PH (2006) Identifying the dominant soil bacterial taxa in libraries of 16S rRNA and 16S rRNA genes. Appl Environ Microbiol 72:1719–1728 Jehlička J, Edwards HG, Oren A (2014) Raman spectroscopy of microbial pigments. Appl Environ Microbiol 80:3286–3295 Kim HY, Park HM, Lee CH (2012) Mass spectrometry-based chemotaxonomic classification of Penicillium species (P. echinulatum, P. expansum, P. solitum, and P. oxalicum) and its correlation with antioxidant activity. J Microbiol Methods 90:327–335 Kim M, Oh HC, Park SC, Chun J (2014) Towards a taxonomic coherence between average nucleotide identity and 16S rRNA gene sequence similarity for species demarcation of prokaryotes. Int J Syst Evol Microbiol 64:346–351 Klassen JL, Foght JM (2008) Differences in carotenoid composition among Hymenobacter and related strains support a tree like model of carotenoid evolution. Appl Environ Microbiol 74:2016–2024 Kloß S et al (2013) Culture independent Raman spectroscopic identification of urinary tract infection pathogens: a proof of principle study. Anal Chem 85:9610–9616 Kolijenovic S, Scut TB, Vincent A, Kros JM, Puppels GJ (2005) Detection of meningioma in dura mater by Raman spectroscopy. Anal Chem 77(24):7958–7965 Krafft C, Neudert L, Simat T, Salzer R (2005) Near infrared Raman spectra of human brain lipids. Spectrochim Acta A 61:1529–1535 Kusić D, Kampe B, Rösch P, Popp J (2014) Identification of water pathogens by Raman microspectroscopy. Water Res 48:179–189 Liaaen Jensen S, Andrewes AG (1972) Microbial carotenoids. Annu Rev Microbiol 26:225–248 Maquelin K et al (2009) Raman spectroscopic typing reveals the presence of carotenoids in Mycoplasma pneumonia. Microbiol Sgm 155:2068–2077 Meisel S, Stöckel S, Rösch P, Popp J (2014) Identification of meat associated pathogens via Raman microspectroscopy. Food Microbiol 38:36–43 Mignard S, Flandrois JP (2006) 16S rRNA sequencing in routine bacterial identification: a 30-month experiment. J Microbiol Methods 67:574–581 Movasaghi Z, Rehman S, Rehman IU (2007) Raman spectroscopy of biological tissues. Appl Spectrosc Rev 42:493–541 Naumann D (1998) Infrared and NIR Raman spectroscopy in medical microbiology. Proc SPIE 3257:245–257 Netzer R et al (2010) Biosynthetic pathway for γ-cyclic sarcinaxanthin in Micrococcus luteus :heterologous expression and evidence for diverse and multiple catalytic functions of C(50) carotenoid cyclises. J Bacteriol 192(21):5688–99 Notingher I, Green C, Dyer C (2004) Discrimination between ricin and sulphur mustard toxicity in vitro using Raman spectroscopy. J R Soc Interface 1:79–90 R Development core team (2008) R: a language and environment for statistical computing. R foundation for statistical computing, Vienna Reddy GSN et al (2003) Kocuria polaris sp. nov., an orange-pigmented psychrophilic bacterium isolated from an Antarctic cyanobacterial mat sample. Int J Syst Evol Microbiol 53:183–187 Rinke C et al (2013) Insights into the phylogeny and coding potential of microbial dark matter. Nature 499:431–437 Rösch P et al (2005) Chemotaxonomic identification of single bacteria by micro-Raman spectroscopy: application to clean-room-relevant biological contaminations. Appl Environ Microbiol 71:1626–1637 Scholtes-Timmerman M, Willemse-Erix H, Schut TB, van Belkum A, Puppels G, Maquelin K (2009) A novel approach to correct variations in Raman spectra due to photo-bleachable cellular components. Analyst 134:387–393 Sigurdsson S, Philipsen PA, Hansen LK, Laesen L, Gniadecka M, Wulf HC (2004) Detection of skin cancer by classification of Raman spectra. IEEE Trans Biomed Eng 51(10):1784–93 Silge A, Schmacher W, Rösch P, da Costa Filho PA, Gerard C, Popp J (2014) Identification of water-conditioned Pseudomonas aeruginosa by Raman microspectroscopy on a single cell level. Syst Appl Microbiol 37:360–367 Silveira L Jr et al (2002) Correlation between near infrared Raman spectroscopy and the histopathological analysis of atheroscelerosis in human coronary arteries. Lasers Surg Med 30(4):290–7 Stewart EJ (2012) Growing unculturable bacteria. J Bacteriol 194:16 Stöckel S, Meisel S, Elschner M, Melzer F, Rösch P and Popp J (2014) Raman spectroscopic detection and identification of Burkholderia mallei and Burkholderia pseudomallei in feedstuff. Anal Bioanal Chem:1-10 Stone N, Kendall C, Smith J, Crow P, Barr H (2004) Raman spectroscopy for identification of epithelial cancers. Faraday Discuss 126:141–157 Van Der Heijden MG, Bardgett RD, van Straalen NM (2008) The unseen majority: soil microbes as drivers of plant diversity and productivity in terrestrial ecosystems. Ecol Lett 11:296–310 Pham VHT, Kim J (2012) Cultivation of unculturable soil bacteria. Trends Biotechnol 30:475–484 Ventura M, Canchaya C, Tauch A, Chandra G, Fitzgerald GF, Chater KF, van Sinderen D (2007) Genomics of Actinobacteria: tracing the evolutionary history of an ancient phylum. MMBR 71:495–548 Walter A, Schumacher W, Bocklitz T, Reinicke M, Rösch P, Kothe E, Popp J (2011) From bulk to single-cell classification of the filamentous growing Streptomyces bacteria by means of Raman spectroscopy. Appl Spectrosc 65:1116–1125 Walter A et al (2010) Analysis of the cytochrome distribution via linear and nonlinear Raman spectroscopy. Analyst 135:908–917 Withnall R, Chowdhry BZ, Silver J, Edwards HG, de Oliveira LF (2003) Raman spectra of carotenoids in natural products. Spectrochim Acta A 59:2207–2212 Whitman WB, Coleman DC, Wiebe WJ (1998) Prokaryotes: the unseen majority. PNAS 95:6578–6583 Xing YL, Bao JW, Cheng YJ, Shuang JL (2007) Micrococcus flavus sp. nov. isolated from activated sludge in a bioreactor. Int J Syst Evol Microbiol 57:66–69 Zhao GZ et al (2009) Micrococcus yunnanensis sp. nov., a novel actinobacterium isolated from surface-sterilized Polyspora axillaris roots. Int J Syst Evol Microbiol 59:2383–2387