Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Chuyển giao oligonucleotit đối kháng c-abl và bcr đến các tế bào myeloid chưa trưởng thành bình thường do lipit mang điện tích dương: Nghiên cứu sự hấp thu, hiệu ứng sinh học và điều chỉnh biểu hiện gen
Tóm tắt
Nghiên cứu sự hấp thu và các hiệu ứng sinh hóa và sinh học của các oligonucleotit đối kháng (ODN) đặc hiệu cho gen c-abl và bcr được thực hiện trên các tế bào myeloid chưa trưởng thành bình thường. Các tế bào dương tính với CD34 đã được tinh chế thông qua phương pháp chọn lọc dương tính và âm tính, sau đó được nuôi cấy trong môi trường lỏng trong 7 ngày. Các tế bào này sau đó được ủ với ODN, riêng biệt hoặc kết hợp với các lipit mang điện tích dương. Sự hấp thu ODN được tăng cường thông qua việc sử dụng lipit mang điện tích dương. Thêm vào đó, nồng độ rất thấp của ODN kèm theo lipit mang điện tích dương có khả năng ức chế một cách đặc hiệu biểu hiện của gen c-abl. Ngược lại, không có ảnh hưởng nào được ghi nhận đối với biểu hiện của bcr. Tuy nhiên, mặc dù việc chặn hiệu quả biểu hiện c-abl, không có sự thay đổi nào trong các mô hình tăng trưởng tế bào được quan sát trong môi trường lỏng cũng như trong thử nghiệm hình thành koloni. Chúng tôi kết luận rằng việc sử dụng lipit mang điện tích dương có thể tăng cường các hiệu ứng điều chỉnh gen của ODN bằng cách làm tăng sự hấp thu của chúng vào các tế bào tạo máu bình thường.
Từ khóa
#oligonucleotit đối kháng #gen c-abl #gen bcr #tế bào myeloid chưa trưởng thành #lipit mang điện tích dươngTài liệu tham khảo
Ben-Neriah Y, Daley GQ, Mes-Masson AM, Witte ON, Baltimore D (1986) The chronic myelogenous leukemia specific p210 protein is the product of the bcr-abl hybrid gene. Science 233:212–215
Benett CF, Chiang MY, Chan H, Shoemaker JEE, Mirabelli CK (1992) Cationic lipids enhance cellular uptake and activity of phosphorothioate antisense oligonucleotides. Mol Pharmacol 41:1023–1033
Bergan R, Connell Y, Fahmy B, Kyle E, Neckers L (1994) Aptameric inhibition of p210bcr-abl tyrosine kinase autophosphorylation by oligodeoxynucleotides of defined sequence and backbone structure. Nucleic Acids Res 22:2150–2154
Capaccioli S, Di Pasquale G, Mini E, Mazzei T, Quattrone A (1993) Cationic lipids improve antisense oligonucleotide uptake and prevent degradation in cultured cells and in human serum. Biochem Biophys Res Commun 197:818–825
Caracciolo D, Valtieri M, Venturelli D, Peschle C, Gewirtz AM, Calabretta B (1989) Lineage-specific requirement of cabl function in normal hematopoiesis. Science 245:1107–1110
Chin DJ, Green GA, Zon G, Skoza JR, Staubinger RM (1990) Rapid nuclear accumulation of injected oligonucleotides. New Biologist 2:1091–100
Chromczynski P, Sacci N (1987) Single step method of RNA isolation by acid-guanidinium-thiocyanate-phenol-chloroform extraction. Anal Biochem 162:156–164
Geselowitz DA, Neckers LM (1992) Analysis of oligonucleotide binding, internalization, and intracellular trafficking utilizing a novel radiolabeled cross-linker. Antisense Res Dev 2:17–25
Giles RV, Tidd DM (1992) Increased specificity for antisense oligodeoxynucleotide targeting of RNA-cleavage by RNAse H using chimeric methypphosphonate/phosphodiester structures. Nucleic Acids Res 20:763–770
Helene C, Toulme JJ (1990) Specific regulation of gene expression by antisense, sense and antigene nucleic acids. Biochim Biophys Acta 1049:99–125
Keller G, Kennedy M, Papayannopoulou T, Wiles MV (1993) Hematopoietic commitment during embryonic stem cell differentiation in culture. Mol Cell Biol 13:473–86
Leonetti JP, Mechti N, Degols G, Gagnor C, Lebleu B (1991) Intracellular distribution of microinjected oligonucleotides. Proc Natl Acad Sci USA 88:2702–2706
Liberati AM, Donti E, Rosso C, Lo Coco F, Dore F, Pardini S, Cocco S, Addis M, Saglio G (1994) Repeated PCR in CML during IFN-alpha therapy. Eur J Haematol 52:152–155
Mc Laughlin LW, Piel N 1984) Oligonucleotide synthesis. A practical approach. In: Gait MJ (ed) Chromatographic purification of synthetic oligonucleotides. IRL Press, Oxford, pp 117–133
Nowell PC, Hungerford DA (1960) A minute chromosome in human granulocytic leukemia. Science 132:1497–1500
Saiki RK, Gelfand DH, Stoffel S, Scharf SJ, Higuchi R, Horn GT, Mullis KB, Erlich HA (1988) Primer-directed enzymatic amplification of DNA with a thermostable DNA polymerase. Science 239:487–490
Spiller DG, Tidd DM (1992) The uptake of chimeric oligonucleotide analogues in human leukemia MOLT-4 cells. Anticancer Drug Des 7:115–119
Thierry AR, Dritschilo A (1992) Intracellular availability of unmodified, phosphorothioated and liposomally encapsulated oligodeoxynucleotides for antisense activity. Nucleic Acids Res 20:5691–5698
Woolf TM, Jennings CG, Rebagliati M, Melton DA (1990) The stability and toxicity and effectiveness of unmodified and phosphorothioate antisense oligodeoxynucleotides inXenopus oocytes and embryos. Nucleic Acids Res 18:1763–9
Zhao Q, Matson S, Herrera CJ, Fisher E, Yu H, Krieg AM (1993) Comparison of cellular binding and uptake of antisense phosphodiester, phosphorothioate, and mixed phosphorothioate and methyphosphonate oligonucleotides. Antisense Res Dev 3:53–66