Nguyên nhân do vi khuẩn của viêm màng đệm mạn tính không được ủng hộ bởi phản ứng chuỗi polymerase đối với DNA 16S rRNA

SAGE Publications - 2005
Linda M. Ernst1, Jill Crouch2, Henry M. Rinder2, John Greg Howe2
1Department of Pathology, Room 5203, Children's Hospital of Philadelphia, 324 South 34th Street, Philadelphia, PA 19104, USA
2Department of Laboratory Medicine, Yale University School of Medicine, 333 Cedar Street, New Haven, CT 06520-8035, USA

Tóm tắt

Viêm màng đệm mạn tính được đặc trưng bởi các nhung mao màng đệm bị thâm nhiễm bởi tế bào lympho, tế bào histiocyte, và đôi khi là tế bào plasma. Trong một tỷ lệ nhỏ các trường hợp, một tác nhân gây nhiễm có thể được chứng minh trong các khu vực viêm màng đệm mạn tính. Tuy nhiên, cơ chế bệnh sinh của hầu hết các tổn thương là không xác định. Viêm màng đệm mạn tính có thể đại diện cho sự lây lan trực tiếp của nhiễm trùng nội mạc tử cung mạn tính do các vi khuẩn mà đặc biệt khó nuôi cấy. Để kiểm tra giả thuyết này, phản ứng chuỗi polymerase (PCR) với các mồi cho DNA 16S rRNA vi khuẩn phổ quát được thực hiện trên ADN được chiết xuất từ các khu vực viêm màng đệm mạn tính được chọn từ cơ sở dữ liệu bệnh lý Yale. Các khu vực cụ thể của viêm màng đệm mạn tính được xác nhận đầu tiên bằng cách kiểm tra các mẫu cắt được nhuộm bằng hematoxylin và eosin và sau đó đã được loại bỏ từ các khối paraffin lưu trữ. Mô kiểm soát có số lượng vi khuẩn đã biết cũng được chuẩn bị để kiểm tra độ nhạy của thí nghiệm. Tất cả các mô đều được tách paraffin, khử nước và tiêu hóa bằng proteinase K. Việc chiết xuất DNA được thực hiện bằng bộ Gentra Puregene. PCR được thực hiện bằng cách sử dụng các mồi p11 và p13 cho DNA 16S rRNA. Sản phẩm mục tiêu khuếch đại 233-bp được xác định thông qua điện di gel agarose. Mười chín mẫu với viêm màng đệm mạn tính đa tâm mà không giới hạn ở các nhung mao neo được nghiên cứu. Không có mẫu viêm màng đệm mạn tính nào có sản phẩm có thể chứng minh bằng cách sử dụng các mồi PCR cho DNA 16S rRNA, mặc dù có đủ DNA trong các mẫu và mẫu kiểm soát. Phép thử đã nhạy cảm đến khoảng 1500 vi khuẩn mỗi mẫu. Kết luận, dữ liệu này không ủng hộ nguyên nhân vi khuẩn cho viêm màng đệm mạn tính.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

10.1016/S0143-4004(84)80019-3

10.1016/S0143-4004(82)80007-6

10.1016/0002-9378(88)90220-7

10.1016/S0046-8177(85)80159-3

10.1016/S0143-4004(85)80047-3

Redline RW, 2000, Arch Pathol Lab Med, 124, 1785, 10.5858/2000-124-1785-PLAWCP

10.1016/S0046-8177(98)90016-8

Russell P, 1980, J Reprod Med, 24, 93

10.1053/plac.1999.0405

10.3109/15513819209023307

10.1016/0046-8177(93)90016-A

10.1016/S0046-8177(96)90374-3

10.1016/0046-8177(94)90252-6

10.1111/j.1600-0897.1986.tb00050.x

10.1111/j.1600-0897.1986.tb00003.x

10.1016/0002-9378(83)90045-5

10.1056/NEJM199207303270501

10.1111/j.1365-2958.1992.tb01352.x

10.1128/JCM.36.12.3492-3496.1998

10.1016/S0002-9394(99)00181-6

10.1128/JCM.39.5.2025-2027.2001

10.1080/15513819609168723

10.1016/S0046-8177(96)90288-9

10.1128/IAI.71.11.6148-6154.2003

10.1007/s004280050150

10.1002/jmv.10212

10.1080/15513819709168569

10.1016/0020-7292(94)90171-6

Nyman M, 2002, Obstet Gynecol, 99, 795

Dong ZW, 2000, J Reprod Med, 45, 410

Eppel W, 2000, Obstet Gynecol, 96, 337

10.1016/S0020-7292(98)00019-8

10.1136/jcp.50.10.852

10.1016/j.jpeds.2003.12.015

10.1016/j.humpath.2004.01.015

KrausFT, Placental pathology. Washington DC: American Registry of Pathology, 2004;102.

Schoeb TR, 1997, Lab Anim Sci, 47, 468

10.1007/BF01709369

Thông tin
Thông tin xuất bản

SAGE Publications

Thông tin tác giả