Đánh giá sự ổn định di truyền ở các cây con phát triển từ phôi sinh dưỡng của Pterocarpus marsupium Roxb. bằng cách sử dụng phân tích lặp lại các trình tự đơn giản giữa các đoạn (ISSR)

Physiology and Molecular Biology of Plants - Tập 25 - Trang 569-579 - 2018
Radhika Tippani1, Rama Swamy Nanna1, Praveen Mamidala2, Christopher Thammidala1,3
1Department of Biotechnology, Kakatiya University, Warangal, India
2Department of Biotechnology, Telangana University, Nizamabad, India
3Department of Botany, Kakatiya University, Warangal, India

Tóm tắt

Một quy trình tái sinh cây con hiệu quả sử dụng phôi hợp tử chưa trưởng thành (IZEs) thông qua quá trình phôi sinh dưỡng đã được phát triển trên cây Pterocarpus marsupium Roxb. Các cây con tái sinh đã được đánh giá về sự ổn định di truyền. IZEs được ủ trên môi trường Murashige và Skoog (MS) bổ sung 1.07–16.11 μM axit naphthalene acetic (NAA) hoặc 0.90–13.97 μM axit 2,4-dichlorophenoxyacetic. Tỉ lệ hình thành mô sẹo tối ưu (96.6%) được quan sát trên môi trường MS bổ sung 5.37 μM NAA. Sự hình thành phôi sinh dưỡng (SEs) được quan sát sau khi cấy lại mô sẹo trên môi trường với nồng độ NAA giảm (0.54–5.37 μM), hoặc 2.69 μM NAA kết hợp với 2.22–8.90 μM benzyladenine (BA) hoặc 2.32–9.30 μM Kinetin. Số lượng phôi sinh dưỡng tối đa (33.4 ± 0.85) xảy ra trên môi trường MS bổ sung 2.69 μM NAA + 4.40 μM BA + 3% sucrose. Tỉ lệ cao nhất (67.3 ± 0.37) của SEs đã trưởng thành và phát triển đến giai đoạn lá mầm qua việc cấy lại trên cùng một môi trường. Việc hình thành và trưởng thành SE giảm khi nồng độ sucrose cao hơn 3%. Bảy mươi phần trăm phôi sinh dưỡng trưởng thành phát triển thành cây con trên môi trường MS nửa nồng độ bổ sung 5.80 µM axit gibberellic. Các giai đoạn khác nhau của quá trình phát triển trong quá trình phôi sinh dưỡng bao gồm giai đoạn hình cầu, hình tim, hình ngư lôi và giai đoạn trưởng thành như đã được tiết lộ qua các nghiên cứu vi mô và mô học của các mẫu vật. Các cây con phát triển từ SEs đã được thích nghi thành công trong nhà kính với tỉ lệ sống sót 78%. Trong số các cây con sống sót, 9 cây con đã được chọn ngẫu nhiên để phân tích lặp lại các trình tự đơn giản giữa các đoạn (ISSR). Trong số 13 mồi được sử dụng, 8 mồi tạo ra các băng mực tái lập và đơn hình. Phân tích ISSR cho thấy một hồ sơ khuếch đại đồng nhất cho tất cả các cây con tái sinh đã được phân tích, xác thực sự ổn định di truyền của các cây con phát triển từ phôi sinh dưỡng.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

Anis M, Husain MK, Shahzad A (2005) In vitro plantlet regeneration of Pterocarpus marsupium Roxb., an endangered leguminous tree. Curr Sci 88:861–863 Anjaneyulu C, Giri CC (2008) Factors influencing somatic embryo maturation, high frequency germination and plantlet formation in Terminalia chebula Retz. Plant Biotechnol Rep 2:153–161 Arnold S, Sabala I, Bozhkov P, Dyachok J, Filonova L (2002) Developmental pathways of somatic embryogenesis. Plant Cell Tissue Organ Cult 69:233–249 Chakraborty A, Gupta N, Ghosh K, Roy P (2010) In vitro evaluation of the cytotoxic, anti-proliferative and anti-oxidant properties of pterostilbene isolated from Pterocarpus marsupium. Toxicol In Vitro 24:1215–1228 Chand S, Singh AK (2004) In vitro shoot regeneration from cotyledonary node explants of a multipurpose leguminous tree, Pterocarpus marsupium Roxb. In Vitro Cell Dev Biol Plant 40:167–170 Chaturani GDG, Subasinghe S, Jayatilleke MP (2006) In vitro establishment, germination and growth performance of Red sandal wood (Pterocarpus santalinus L.). Trop Agric Res Ext 9:116–130 Corredoira E, Ballester A, Ibarra M, Vieitez AM (2015) Induction of somatic embryogenesis in explants of shoot cultures established from adult Eucalyptus globulus and E. saligna × E. maidenii trees. Tree Physiol 35:678–690 Das P (2011) In vitro somatic embryogenesis in some oil yielding tropical tree species. Am J Plant Sci 2:217–222 Doyle JJ, Doyle JL (1990) Isolation of plant DNA from fresh tissue. Focus 12:13–15 Husain MK, Anis M, Shahzad A (2008) In vitro propagation of a multipurpose leguminous tree (Pterocarpus marsupium Roxb.) using nodal explants. Acta Physiol Plant 30:353–359 Husain MK, Anis M, Shahzad A (2010) Somatic embryogenesis and plant regeneration in Pterocarpus marsupium Roxb. Trees 24:781–787 Kim YW, Park SY, Park IS, Moon HK (2007) Somatic embryogenesis and plant regeneration from immature seeds of Magnolia obovata Thunberg. Plant Biotechnol Rep 1:237–242 Kirtikar KR, Basu BD (2012) Indian medicinal plants, vol 1, 2nd edn. International Book Distributors, New Delhi, p 828 Kong DM, Preece JE, Shen HL (2012) Somatic embryogenesis in immature cotyledons of Manchurian ash (Fraxinus mandshurica Rupr.). Plant Cell Tissue Organ Cult 108:485–492 Kosaraju J, Madhunapantula SV, Chinni S, Khatwal RB, Dubala A, Nataraj SKM, Basavan D (2014) Dipeptidyl peptidase-4 inhibition by Pterocarpus marsupium and Eugenia jambolana ameliorates streptozotocin induced Alzheimer’s disease. Behav Brain Res 267:55–65 Lara-Chavez A, Flinn BS, Egertsdotter U (2011) Initiation of somatic embryogenesis from immature zygotic embryos of Oocarpa pine (Pinus oocarpa Schiede ex Schlectendal). Tree Physiol 31:539–554 Manickam M, Ramanathan M, Jahromi MA, Chansouria JP, Ray AB (1997) Anti-hyperglycemic activity of phenolics from Pterocarpus marsupium. J Nat Prod 60:609–610 Martin M, Sarmento D, Oliveira MM (2004) Genetic stability of micropropagated almond plantlets, as assessed by RAPD and ISSR markers. Plant Cell Rep 23:492–496 Mauri PV, Manzanera JA (2004) Effect of abscisic acid and stratification on somatic embryo maturation and germination of holm oak (Quercus ilex L.). In Vitro Cell Dev Biol Plant 40:495–498 Mikuła A, Pożoga M, Grzyb M, Rybczyński JJ (2015) An unique system of somatic embryogenesis in the tree fern Cyathea delgadii Sternb.: the importance of explant type, and physical and chemical factors. Plant Cell Tissue Organ Cult 123:467–478 Murashige T, Skoog FA (1962) Revised medium for growth and bioassay with tobacco tissue culture. Plant Physiol 15:473–479 Naz R, Anis M, Alatar AA (2016) ISSR marker-based detection of genomic stability in Cassia occidentalis L. plantlets derived from somatic embryogenesis. Eng Life Sci 16:17–24 Prakash MG, Gurumurthi K (2010) Effects of type of explant and age, plant growth regulators and medium strength on somatic embryogenesis and plant regeneration in Eucalyptus camaldulensis. Plant Cell Tissue Organ Cult 100:13–20 Radhika T, Mahendar P, Venkatesham A, Reddy ARN, Narsimha RY, Krishna DR, Christopher T, Sadanandam A (2010) Antioxidant and analgesic activities of Pterocarpus marsupium Roxb. J Herbs Spices Med Plants 16:63–68 Radhika T, Laxmi Jaya Shankar P, Mahendar P, Sirisha K, Sadanandam A, Christopher T (2013a) Pterostilbene as a potential novel telomerase inhibitor: molecular docking studies and its in vitro evaluation. Curr Pharm Biotechnol 14:1027–1035 Radhika T, Rajesh Y, Mallesham B, Mahendar P, Sadanandam A, Christopher T (2013b) In vitro plantlet regeneration and Agrobacterium tumefaciens-mediated genetic transformation of Indian Kino tree (Pterocarpus marsupium Roxb.). Acta Physiol Plant 35:3437–3446 Rai MK, Phulwaria M, Harish Gupta AK, Shekhawat NS, Jaiswal U (2012) Genetic homogeneity of guava plants derived from somatic embryogenesis using SSR and ISSR markers. Plant Cell Tissue Organ Cult 111:259–264 Rizvi SI, Mishra N (2013) Traditional Indian medicines used for the management of diabetes mellitus. J Diabetes Res. https://doi.org/10.1155/2013/712092 Rutledge RG, Stewart D, Caron S, Overton C, Boyle B, MacKay J, Klimaszewska K (2013) Potential link between biotic defense activation and recalcitrance to induction of somatic embryogenesis in shoot primordia from adult trees of white spruce (Piceaglauca). BMC Plant Biol 13:1–17 Saeed T, Shahzad A (2015) High frequency plant regeneration in Indian Siris via cyclic somatic embryogenesis with biochemical, histological and SEM investigations. Ind Crop Prod 76:623–637 Sakakibara H (2006) Cytokinins: activity, biosynthesis, and translocation. Annu Rev Plant Biol 57:431–449 Singh AK, Chand S (2003) Somatic embryogenesis and plant regeneration from cotyledon explants of timber yielding leguminous tree Dalbergia sissoo Roxb. J Plant Physiol 160:415–421 Siragusa M, Carra A, Salvia L, Puglia AM, De Pasquale F, Carimi F (2007) Genetic instability in calamondin (Citrus madurensis Lour.) plants derived from somatic embryogenesis induced by diphenylurea derivatives. Plant Cell Rep 26:1289–1296 Thengane SR, Deodhar SR, Bhosl SV, Rawal SK (2006) Direct somatic embryogenesis and plant regeneration in Garcinia indica Choiss. Curr Sci 91:1074–1078 Tiwari S, Pankaj S, Kanchan S (2004) In vitro propagation of Pterocarpus marsupium Roxb. An endangered medicinal tree. Ind J Biotechnol 3:422–425 Wang W, Zhao X, Zhuang G, Wang S, Chen F (2008) Simple hormonal regulation of somatic embryogenesis and/or shoot organogenesis in caryopsis cultures of Pogonatherum paniceum (Poaceae). Plant Cell Tissue Organ Cult 95:57–67 Woodward AW, Bartel B (2005) Auxin: regulation, action, and interation. Ann Bot (Lond) 95:707–735 World Conservation Monitoring Centre (1998) Pterocarpus marsupium IUCN red list of threatened species. Version 2006. International Union for Conservation of Nature. Retrieved 11 May 2006. Listed as Vulnerable (VU A1 cd v2.3) Yang L, Li Y, Shen H (2012) Somatic embryogenesis and plant regeneration from immature zygotic embryo cultures of mountain ash (Sorbus pohuashanensis). Plant Cell Tissue Organ Cult 109:547–556 Yang L, Bian L, Shen HL, Li YH (2013) Somatic embryogenesis and plantlet regeneration from mature zygotic embryos of Manchurian ash (Fraxinus mandshurica Rupr.). Plant Cell Tissue Organ Cult 115:115–125