Phân tích các tế bào tuyến thượng thận của chuột trong văn hóa nguyên thủy được phân tách bằng phương pháp lắng đọng theo vận tốc

Springer Science and Business Media LLC - Tập 223 - Trang 675-684
Robert B. Goldberg1
1Department of Biology, SUNY College at Fredonia, Fredonia, USA

Tóm tắt

Phương pháp tách tế bào được sử dụng để theo dõi số phận của các tế bào vỏ thượng thận trong môi trường nuôi cấy nguyên thủy, và để đánh giá một số thay đổi diễn ra khi các tế bào thích nghi với điều kiện nuôi cấy. Các văn hóa nguyên thủy của tuyến thượng thận chuột được phân tách bằng trypsin và tách bằng phương pháp lắng đọng theo vận tốc dưới trọng lực đơn vị. Sau hai ngày trong môi trường nuôi cấy, các tế bào cho thấy một hồ sơ lắng đọng tái lập được bao gồm hai lớp tế bào với tốc độ lắng trung bình lần lượt là 5,8 và 2,1 mm/h, và một đỉnh lắng thứ ba chủ yếu gồm các nhân với tốc độ 0,5 mm/h. Tất cả các quần thể tế bào vẫn tiếp tục tích hợp 3H-thymidine với tỷ lệ tương đối không thay đổi trong suốt thời gian nuôi cấy, nhưng số lượng tương đối của các tế bào trong đỉnh 2,1 mm/h đã tăng gấp đôi trong vài ngày cuối của văn hóa nguyên thủy. Các tế bào được đánh dấu trong điều kiện nuôi cấy nguyên thủy, nhưng được tách ra sau 5 ngày nuôi cấy thứ cấp đã bị mất một tỷ lệ nhiều hơn các tế bào được đánh dấu từ đỉnh 5,8 mm. Kết quả cho thấy rằng các tế bào của đỉnh 2,1 mm sống lâu hơn trong môi trường nuôi cấy ở trạng thái hậu tái bản.

Từ khóa

#tế bào thượng thận #nuôi cấy nguyên thủy #tách tế bào #lắng đọng #trypsin #3H-thymidine

Tài liệu tham khảo

Barofsky A, Feinstein M, Halkerston IDK (1973) Enzymatic and mechanical requirements for the dissociation of cortical cells from rat adrenal glands. Exp Cell Res 79:263–274 Biswas S, MacDougall JDB, Coupland RE (1967) Effect of hyperbaric oxygen on corticosteroid secretion and morphology of organ cultures of adult rat adrenal glands. J Endocrinol 39:233–249 Denef C, Hautekeete E, Dewals R (1978) Monolayer cultures of gonadotrophs separated by velocity sedimentation: heterogeneity in response to luteinizing hormone-releasing hormone. Endocrinology 102:736–747 Goldberg RB, Geremia R, Bruce WR (1977) Histone synthesis and replacement during spermatogenesis in the mouse. Differentiation 7:167–180 Halkerston IDK (1968) Heterogeneity of the response of adrenal cortex tissue slices to adenocorticotrophin. In: McKerns KW (ed) Functions of the adrenal cortex. Appleton-Century Crofts, New York, pp 399–461 Miller RG (1973) Separation of cells by velocity sedimentation. In: Pain RH, Smith BJ (eds) New techniques in biophysics and cell biology. John Wiley, New York, pp 87–112 O'Hare MJ, Neville AM (1973) The steroidogenic response of adult rat adrenocortical cells in monolayer culture. J Endocrinol 56:537–549 Slavinski E, Auersperg N, Jull JW (1974) Propagation in vitro of functional rat adrenal cortical cells: modifications of the differentiated state by culture conditions. In vitro 9:260–269 Slavinski EA, Jull JW, Auersperg N (1976) Steroidogenic pathways and trophic response to adrenocorticotrophin of cultured adrenocortical cells in different states of differentiation. J Endocrinol 69:385–394 Tait JS, Tait SAS, Gould RP, Mee MSR (1974) The properties of adrenal zona glomerulosa cells after purification by gravitational sedimentation. Proc R Soc Lond (Biol) 185:375–407 Turley EA (1980) The control of adrenocortical cytodifferentiation by extracellular matrix. Differentiation 17:93–103 Voutilainen R (1979) Steroidogenesis in tissue culture of fetal and adult human adrenals with special reference to cortisol/corticosterone ratio and aldosterone secretion. J Steroid Biochem 10:115–120