Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Phương pháp cải tiến để tinh chế tế bào sao từ gan chuột với Dichloromethylene Diphosphate (CL2MDP)
Tóm tắt
Quần thể tế bào perisinusoidal gan bao gồm tế bào sao gan, tế bào Kupffer, tế bào nội mạch và tế bào Pit. Những tế bào này được tách ra bằng phương pháp tiêu hóa enzym và tinh khiết hóa bằng ly tâm gradient mật độ. Với việc tách tế bào sao, phương pháp truyền thống không thể loại bỏ hoàn toàn sự ô nhiễm tế bào Kupffer vì mật độ của hai loại tế bào này tương tự nhau. Chúng tôi báo cáo ở đây một phương pháp cải tiến để tách biệt tế bào sao gan tinh khiết cao, sử dụng dichloromethylene diphosphate (CL2MDP), có tính độc tế bào chọn lọc đối với tế bào Kupffer. Ba ngày sau khi tiêm truyền tĩnh mạch đơn lần CL2MDP đóng gói trong liposome, hầu như tất cả các tế bào Kupffer đã biến mất khỏi gan. Sau khi ly tâm gradient mật độ Percoll, độ tinh khiết của tế bào sao gan vượt quá 98% mà không có sự ô nhiễm của tế bào Kupffer. Tế bào Kupffer được báo cáo có ảnh hưởng đến các chức năng sinh lý của tế bào sao. Sự có mặt của các tế bào sao được tinh chế cao sẽ tạo điều kiện thuận lợi cho việc nghiên cứu các chức năng của chúng trong nuôi cấy ban đầu.
Từ khóa
#tế bào sao gan #tế bào Kupffer #tinh chế tế bào #dichloromethylene diphosphate #nền culture nguyên phátTài liệu tham khảo
Ballardini G, Groff P, Badiali de Giorgi L, et al. (1994). Ito cell heterogeneity: Desmin-negative Ito cells in normal rat liver. Hepatology 19(2): 440–446.
Braet F, De Zanger R, Sasaoki T, et al. (1994). Assessment of a method of isolation, purification, and cultivation of rat liver sinusoidal endothelial cells. Lab Invest 70(6): 944–952.
Francini G, Gonnelli S, Petrioli R, et al. (1992). Treatment of bone metastases with dichloromethylene bisphosphonate. J Clin Oncol 10(4): 591–598.
Friedman SL, Roll FJ (1987). Isolation and culture of hepatic lipocytes, Kupffer cells, and sinusoidal endothelial cells by density gradient centrifugation with Stractan. Anal Biochem 161(1): 207–218.
Friedman SL (1993). Seminars in medicine of the Beth Israel Hospital, Boston. The cellular basis of hepatic fibrosis. Mechanisms and treatment strategies. [Review]. N Engl J Med 328(25): 1828–1835.
Hardonk MJ, Dijkhuis FW, Hulstaert CE, Koudstaal J (1992). Heterogeneity of rat liver and spleen macrophages in gadolinium chloride-induced elimination and repopulation. J Leukoc Biol 52(3): 296–302.
Ishizaka S, Kuriyama S, Tsujii T (1989). In vivo depletion of macrophages by desulfated iotacarrageenan in mice. J Immunol Methods 124(1): 17–24.
Kagan E, Hartmann DP (1984). Elimination of macrophages with silica and asbestos. Methods Enzymol 108: 325–335.
Kawada N, Kuroki T, Kobayashi K, et al. (1996). Expression of heat-shock protein 47 in mouse liver. Cell Tissue Res 284(2): 341–346.
Knittel T, Aurisch S, Neubauer K, Eichhorst S, Ramadori G (1996). Cell-type-specific expression of neural cell adhesion molecule (N-CAM) in Ito cells of rat liver. Up-regulation during in vitro activation and in hepatic tissue repair. Am J Pathol 149(2): 449–462.
Naito M, Nagai H, Kawano S, et al. (1996). Liposome-encapsulated dichloromethylene diphosphonate induces macrophage apoptosis in vivo and in vitro. J Leukoc Biol 60(3): 337–344.
Pomeroy C, Filice GA (1988). Effect of intravenous silica on the course of Nocardia asteroides pneumonia. Infect Immun 56(9): 2507–2511.
Seglen PO (1976). Preparation of isolated rat liver cells. Methods Cell Biol 13: 29–83.
Senoo H, Hata R (1993). Isolation of perisinusoidal stellate cells (vitamin A-storing cells) of the liver. Connect Tiss 25: 129–137.
Smedsrod B, Pertoft H, Eggertsen G, Sunderstrom C (1985). Functional and morphological characterization of Kupffer cells and liver endothelial cells prepared by means of density separation in Percoll and selective substrate adherence. Cell Tissue Res 241: 639–649.
Takahara T, Kojima T, Miyabayashi C, et al. (1988). Collagen production in fat-storing cells after carbon tetrachloride intoxication in the rat. Immunoelectron microscopic observation of type I, type III collagens, and prolyl hydroxylase. Lab Invest 59(4): 509–521.
Tsukamoto S, Akaza H, Onozawa M, et al. (1998). A five-alpha reductase inhibitor or an antiandrogen prevents the progression of microscopic prostate carcinoma to macroscopic carcinoma in rats. Cancer 82(3): 531–537.
US Department of Health and Human Services (1985). Guide for the care and use of laboratory animals. NIH Publication No. 85–23.
Van Rooijen N (1989). The liposome-mediated macrophage ‘suicide’ technique. J Immunol Methods 124(1): 1–6.
Yang L, Faris RA, Hixson DC (1993). Long-term culture and characteristics of normal rat liver bile duct epithelial cells. Gastroenterology 104(3): 840–852.
Zenilman ME, Fiani M, Stahl PD, et al. (1989). Selective depletion of Kupffer cells in mice by intact ricin. Transplantation 47(1): 200–203.