Điều chỉnh phương pháp ITS-PCR điểm cuối cổ điển để chẩn đoán bệnh trichomonosis ở gia cầm thành PCR thời gian thực tiết lộ đại bàng Bonelli là một ký chủ mới cho Trichomonas gypaetinii

Parasitology Research - Tập 121 - Trang 3663-3670 - 2022
Sandra Alejandro Mateo1, Iris Azami-Conesa1, Bárbara Martín-Maldonado2,3, Natalia Pastor-Tiburón2, Raquel Martín-Hernández4,5, Fernando González-González2, María Teresa Gómez-Muñoz1
1Department of Animal Health, Faculty of Veterinary Sciences, University Complutense of Madrid, Madrid, Spain
2Group of Rehabilitation of the Autochtonous Fauna and Their Habitat (GREFA), Madrid, Spain
3Department of Veterinary Medicine, School of Biomedical and Health Sciences, Universidad Europea de Madrid, Villaviciosa de Odón, Spain
4Laboratorio de Patología Apícola, Centro de Investigación Apícola Y Agroambiental (CIAPA), Consejería de Agricultura de la Junta de Comunidades de Castilla-La Mancha, IRIAF. Instituto Regional de Investigación Y Desarrollo Agroalimentario Y Forestal, Marchamalo, Spain
5Instituto de Recursos Humanos Para La Ciencia Y La Tecnología (INCRECYT-FSE), Fundación Parque Científico Y Tecnológico de Castilla-La Mancha, Albacete, Spain

Tóm tắt

Bệnh trichomonosis ở gia cầm là một căn bệnh do ký sinh trùng gây ra chủ yếu bởi Trichomonas gallinae và các loài Trichomonas khác. Căn bệnh này có thể không có triệu chứng, hoặc có thể gây ra tổn thương hoại tử ở đường tiêu hóa trên và lan rộng đến các cơ quan khác, gây chết cho những con chim bị nhiễm. Trong nghiên cứu này, chúng tôi nhằm đánh giá một phương pháp PCR thời gian thực thích nghi để chẩn đoán các kiểu gen và loài khác nhau của trichomonads miệng họng ở gia cầm. Năm mươi sáu mẫu từ họng miệng của đại bàng Bonelli (Aquila fasciata) thu thập được trong khoảng thời gian từ năm 2018 đến 2019 đã được phân tích bằng phương pháp PCR thời gian thực và PCR điểm cuối, cả hai đều nhắm đến các trichomonads ITS, và kết quả được so sánh bằng hệ số đồng thuận. Tất cả các mẫu dương tính đã được giải mã chuỗi. Phân tích cho thấy tỷ lệ phát hiện của PCR thời gian thực ITS cao hơn so với PCR điểm cuối ITS (64,3% so với 55,4%) và giá trị đồng thuận tốt (Kappa = 0,816). Giá trị nhiệt độ nóng chảy cho các amplicon kết quả của PCR thời gian thực cho các trichomonads ở gia cầm là 83.45 ± 0.72 °C. Các kiểu gen A, D và III đã được tìm thấy trong các chuỗi. Hơn nữa, Trichomonas gypaetinii, một loài phổ biến ở các loài chim ăn xác thối, lần đầu tiên được báo cáo ở đại bàng Bonelli.

Từ khóa

#Trichomonas gallinae #bệnh trichomonosis #PCR thời gian thực #đại bàng Bonelli #Trichomonas gypaetinii

Tài liệu tham khảo

Alrefaei AF, Gerhold RW, Nader JL, Bell DJ, Tyler KM (2019) Improved subtyping affords better discrimination of Trichomonas gallinae strains and suggests hybrid lineages. Infect Genet Evol 73:234–241. https://doi.org/10.1016/j.meegid.2019.05.007 Asadzadeh M, Ahmad S, Al-Sweih N, Khan Z (2019) Rapid and accurate identification of Candida albicans and Candida dubliniensis by real-time PCR and melting curve analysis. Med Princ Pract 27:543–548. https://doi.org/10.1159/000493426 Amin A, Bilic I, Liebhart D, Hess M (2014) Trichomonads in birds-a review. Parasitology 141:733–747. https://doi.org/10.1017/S0031182013002096 BirdLife International (2016) Aquila fasciata. The IUCN red list of threatened species 2016. Available online: https://www.iucnredlist.org/species/22696076/155464015 Accessed 10 July 2022. Chi JF, Lawson B, Durrant C, Beckmann K, John S, Alrefaei AF, Kirkbride K, Bell DJ, Cunningham AA, Tyler KM (2013) The finch epidemic strain of Trichomonas gallinae is predominant in British non-passerines. Parasitology 140:1234–1245. https://doi.org/10.1017/S0031182013000930 Esvaran VG, Mohanasundaram A, Mahadeva S, Gupta T, Ponnuvel KM (2019) Development and comparison of real-time and conventional PCR tools targeting β-tubulin gene for detection of Nosema infection in silkworms. J Parasit Dis 43:31–38. https://doi.org/10.1007/s12639-018-1053-4 Felleisen RSJ (1997) Comparative sequence analysis of 5·8S rRNA genes and internal transcribed spacer (ITS) regions of trichomonadid protozoa. Parasitology 115:111–119. https://doi.org/10.1017/S0031182097001212 Forrester DJ, Foster GW (2008) Trichomonosis. In: Atkinson CT, Thomas NJ, Hunter DB (eds) Parasitic diseases of wild birds. Wiley- Blackwell, John Wiley and Sons Ltd, Ames, Iowa USA, pp 120–153 Gerhold RW, Yabsley MJ, Smith AJ, Ostergaard E, Mannan W, Cann JD, Fischer JR (2008) Molecular characterization of the Trichomonas gallinae morphologic complex in the United States. J Parasitol 94:1335–1341. https://doi.org/10.1645/GE-1585.1 GrabensteinerE BI, Kolbe T, Hess M (2010) Molecular analysis of clonal trichomonad isolates indicate the existence of heterogenic species present in different birds and within the same host. Vet Parasitol 172:53–64. https://doi.org/10.1016/j.vetpar.2010.04.015 Gil-Sánchez JM, Moleón M, Otero M, Bautista J (2004) A nine-year study of successful breeding in a Bonelli’s eagle population in southeast Spain: a basis for conservation. Biol Conserv 118:685–694. https://doi.org/10.1016/j.biocon.2003.10.017 Girard YA, Rogers KH, Woods LW, Chouicha N, Miller WA, Johnson CK (2014) Dual-pathogen etiology of avian trichomonosis in a declining band-tailed pigeon population. Infect Genet Evol 24:146–156. https://doi.org/10.1016/j.meegid.2014.03.002 Girard YA, Rogers KH, Gerhold R, Land KM, Lenaghan SC, Woods LW, Haberkern N, Hopper M, Cann JD, Johnson CK (2013) Trichomonas stableri n. sp., an agent of trichomonosis in Pacific Coast band-tailed pigeons (Patagioenas fasciata monilis). Int J Parasitol Parasites Wildl 3:32–40. https://doi.org/10.1016/j.ijppaw.2013.12.002 Hoefle U, Blanco JM, Palma L, Melo P (2000) Trichomoniasis in Bonelli’s eagle (Hieraaetus fasciatus) nestlings in south-west Portugal. In: Lumeij JT, Remple JD, Redig P, Lierz M, Cooper JE (eds) Raptor Biomedicine III. Zoological Education Network, Lake Worth, FL USA, pp 44–51 Kelly-Clark WK, McBurney S, Forzán MJ, Desmarchelier M, Greenwood SJ (2013) Detection and characterization of a Trichomonas isolate from a rehabilitated bald eagle (Haliaeetus leucocephalus). J Zoo Wildl Med 44:1123–1126. https://doi.org/10.1638/2013-0085R.1 Kim DH, Chon JW, Kim H, Kim HS, Choi D, Kim YJ, Yim JH, Moon JS, Seo KH (2014) Comparison of culture, conventional and real-time PCR methods for Listeria monocytogenes in foods. Korean J Food Sci Anim Resour 34:665–673. https://doi.org/10.5851/kosfa.2014.34.5.665 Lawson B, Cunningham AA, Chantrey J, Hughes LA, John SK, Bunbury N, Bell DJ, Tyler KM (2011) A clonal strain of Trichomonas gallinae is the aetiologic agent of an emerging avian epidemic disease. Infect Genet Evol 11:1638–1645. https://doi.org/10.1016/j.meegid.2011.06.007 Martínez-Herrero MC, Sansano-Maestre J, López Márquez I, Obón E, Ponce C, González J, Garijo-Toledo MM, Gómez-Muñoz MT (2014) Genetic characterization of oropharyngeal trichomonad isolates from wild birds indicates that genotype is associated with host species, diet and presence of pathognomonic lesions. Avian Pathol 43:535–546. https://doi.org/10.1080/03079457.2014.967660 Martínez-Herrero MC, González-González F, López-Márquez I, García-Peña FJ, Sansano-Maestre J, Martínez-Díaz RA, Ponce-Gordo F, Garijo-Toledo MM, Gómez-Muñoz MT (2019) Oropharyngeal trichomonosis due to Trichomonas gypaetinii in a cinereous vulture (Aegypius monachus) fledgling in Spain. J Wildl Dis 55:153–157. https://doi.org/10.7589/2017-11-274 Martínez-Herrero MC, Sansano-Maestre J, Azami-Conesa I, González- González F, Suárez- Regalado L, Garijo-Toledo MM, Gómez-Muñoz MT (2021) Sequence subtyping of Trichomonas gallinae from Bonelli´s eagle (Aquila fasciata) during four years (2014–2017) reveals that MLST type is associated with moderate and severe lesions. Avian Pathol 50(4):339–349. https://doi.org/10.1080/03079457.2021.1940099 Martínez-Díaz RA, Ponce-Gordo F, Rodríguez-Arce I, Martínez-Herrero MC, González-González F, Molina-López RA, Gómez-Muñoz MT (2015) Trichomonas gypaetinii n. sp., a new trichomonad from the upper gastrointestinal tract of scavenging birds of prey. Parasitol Res 114:101–112. https://doi.org/10.1007/s00436-014-4165-5 Marx M, Reiner G, Willems H et al (2017) High prevalence of Trichomonas gallinae in wild columbids across western and southern Europe. Parasites Vectors 10:242. https://doi.org/10.1186/s13071-017-2170-0 Mohammadiha A, Mohebali M, Haghighi A, Mahdian R, Abadi AR, Zarei Z, Yeganeh F, Kazemi B, Taghipour N, Akhoundi B (2013) Comparison of real-time PCR and conventional PCR with two DNA targets for detection of Leishmania (Leishmania) infantum infection in human and dog blood samples. Exp Parasitol 133:89–94. https://doi.org/10.1016/j.exppara.2012.10.017 Palma L, Beja P, Pais M, Cancela Da Fonseca L (2006) Why do raptors take domestic prey? the case of Bonelli’s eagles and pigeons. J Appl Ecol 43:1075–1086. https://doi.org/10.1111/j.1365-2664.2006.01213.x Real J, Mañosa S, Muñoz E (2000) Trichomoniasis in a Bonelli’s eagle population in Spain. J Wildl Dis 36:64–70. https://doi.org/10.7589/0090-3558-36.1.64 Sansano-Maestre J, Garijo-Toledo MM, Gómez-Muñoz MT (2009) Prevalence and genotyping of Trichomonas gallinae in pigeons and birds of prey. Avian Pathol 38:201–207. https://doi.org/10.1080/03079450902912135 Santos N, Jambas J, Monteiro A, Amaral J, Martins N, Garcia J, Fernández AM, Tyler KM, Almeida T, Abrantes J, Esteves PJ (2019) Trichomonas infection in a community of free-ranging domestic and wild columbiformes and Bonelli’s eagle (Aquila fasciata). Front Vet Sci 6:4–8. https://doi.org/10.3389/fvets.2019.00148 Sigrist B, Ng TWC, Albini S, Wolfrum N (2022) A new duplex real-time PCR for simultaneous detection and differentiation of Tetratrichomonas gallinarum and Trichomonas gallinae. J Vet Diagn Invest 34(4):631–637. https://doi.org/10.1177/10406387221098069 Rentería-Solís Z, Nguyen-Ho-Bao T, Taha S, Daugschies A (2020) A SYBR green I real-time polymerase chain reaction (PCR) assay for detection and quantification of Trichomonas gallinae. Parasitol Res 119:3909–3913. https://doi.org/10.1007/s00436-020-06887-x Tomikawa S, Nakagun S, Watanabe Y, Saito K, Kobayashi Y (2021) Molecular characterization of Trichomonas gypaetinii isolated from the upper alimentary tract of Steller’s sea eagles (Haliaeetus pelagicus) and white-tailed sea eagles (Haliaeetus albicilla) in Hokkaido, Japan. Parasitol Res 2:2189–2198. https://doi.org/10.1007/s00436-021-07160-5