Một loại β-glucosidase ổn định nhiệt độ được phân lập từ một loài vi khuẩn thuộc chi Thermus

Springer Science and Business Media LLC - Tập 29 - Trang 55-60 - 1988
Mitsunori Takase1, Koki Horikoshi1
1The Superbugs Project, Research Development Corporation of Japan, Tokyo, Japan

Tóm tắt

Một loại vi khuẩn hiếu khí có khả năng sống ở nhiệt độ cao, sản sinh ra β-glucosidase, đã được phân lập từ đất thu thập tại suối nước nóng Yudanaka ở Nhật Bản. Vi khuẩn này được xác định thuộc về chi Thermus. Sự sản xuất β-glucosidase của vi khuẩn này được kích thích bởi việc bổ sung cellobiose hoặc laminaribiose vào môi trường nuôi cấy. pH và nhiệt độ tối ưu của enzyme là 4.5–6.5 và 85° C tương ứng. Enzyme này ổn định trong khoảng pH từ 4.5 đến 7.0 ở 70° C trong 2 giờ, và thời gian bán hủy ở 75° C là 5 ngày. Giá trị K m của enzyme đối với p-nitrophenyl-β-d-glucopyranoside, được đo ở 70° C trong dung dịch đệm phosphate sodium 0.1 M (pH 6.5), là 0.28 mM trong khi giá trị K m cho cellobiose là 2.0 mM. Enzyme này có khả năng thuỷ phân cellobiose hiệu quả ở 70° C với tỷ lệ chuyển đổi từ cellobiose sang glucose lần lượt là 95%, 93% và 90% tại nồng độ chất nền 5%, 10% và 15%.

Từ khóa

#β-glucosidase #vi khuẩn hiếu khí #Thermus #nhiệt độ cao #cellobiose

Tài liệu tham khảo

Aït N, Creuzet N, Cattaneo J (1979) Characterization and purification of thermostable β-glucosidase from Clostridium thermocellum. Biochem Biophys Res Comm 90:537–546 Aït N, Creuzet N, Cattaneo J (1982) Properties of β-glucosidase, purified from Clostridium thermocellum. J Gen Microbiol 128:569–577 Brock TD (1984) Genus Thermus Brock and Freeze. In: Thermus G, Krieg NR (eds) Bergey's manual of systematic bacteriology, vol. 1. Williams and Wilkins, Baltimore, pp 333–337 Duff SJB, Cooper DG, Fuller OM (1987) Effect of media composition and growth conditions on production of cellulase and β-glucosidase by a mixed fungal fermentation. Enzyme Microbiol Technol 9:47–52 Fleming LW, Duerksen JD (1967) Purification and characterization of yeast β-glucosidase. J Bacteriol 93:135–141 Han YW, Srinivasan VR (1969) Purification and characterization of β-glucosidase of Alcaligenes faecalis. J Bacteriol 100:1355–1363 Harrigan WF, McCane ME (1966) Laboratory methods in microbiology, Academic Press, New York Heyworth R, Walker PG (1962) Almond-emulsion β-glucosidase and β-galactosidase. Biochem J 83:331–335 Love DR, Streiff MB (1987) Molecular cloning of a β-glucosidase gene from an extremely thermophilic anaerobe in E. coli and B. subtilis. Biotechnology 5:384–388 Lowry OH, Rosebrough NJ, Farr AL, Randall RJ (1951) Protein measurement with the Folin phenol reagent. J Biol Chem 193:265–275 Pask-Hughes RA, Williams RAD (1977) Yellow-pigmented strains of Thermus spp. from Icelandic hot springs. J Gen Microbiol 102:375–383 Ramely RF, Hixson J (1970) Isolation of a non-pigmented, thermophilic bacterium similar to Thermus aquaticus. J Bacteriol 103:527–528 Reese ET (1977) Degradation of polymeric carbohydrates by microbial enzymes. Recent Adv Phytochem 11:311–365 Rudick MJ, Elbein AD (1973) Glycoprotein enzymes secreted by Aspergillus fumigatus. Purification and properties of β-glucosidase. J Biol Chem 248:6506–6513 Sternberg D, Viyayakumar P, Reese E (1976) β-Glucosidase microbial production and effect on enzymatic hydrolysis of cellulose. Can J Microbiol 23:139–147 Tamaoka J, Komagata K (1984) Determination of DNA base composition by reversed-phase high-performance liquid chromatography. FEMS Microbiol Lett 25:125–128 Yamanobe T, Mitsuishi Y, Takasaki Y (1987) Isolation of a cellulolytic enzyme producing microorganism, culture conditions and some properties of the enzyme. Agric Biol Chem 51:65–74