Hệ thống đơn giản hóa để tạo ra virus adenovirus tái tổ hợp

Tong‐Chuan He1, Shibin Zhou1, Luís Teixeira da Costa1, Jian Yu1, Kenneth W. Kinzler1, Bert Vogelstein1
1The Howard Hughes Medical Institute, The Program in Human Genetics and Molecular Biology, The Johns Hopkins Oncology Center, 424 North Bond Street, Baltimore, MD 21231

Tóm tắt

Các virus adenovirus tái tổ hợp cung cấp một hệ thống linh hoạt cho nghiên cứu biểu hiện gen và ứng dụng điều trị. Chúng tôi báo cáo một chiến lược ở đây giúp đơn giản hóa việc tạo ra và sản xuất các virus như vậy. Một plasmid adenovirus tái tổ hợp được tạo ra với tối thiểu các thao tác enzym, sử dụng tái tổ hợp tương đồng trong vi khuẩn thay vì trong tế bào eukaryote. Sau khi truyền các plasmid như vậy vào một dòng tế bào đóng gói động vật có vú, quá trình sản xuất virus có thể được theo dõi một cách thuận tiện với sự trợ giúp của protein huỳnh quang xanh, được mã hóa bởi một gen được tích hợp vào khung virus. Các virus đồng nhất có thể thu được từ quy trình này mà không cần tinh sạch bằng phương pháp đĩa. Hệ thống này dự kiến sẽ tăng tốc quá trình tạo ra và kiểm tra các virus adenovirus tái tổ hợp cho nhiều mục đích khác nhau.

Từ khóa


Tài liệu tham khảo

10.1038/357455a0

10.1146/annurev.bi.62.070193.001203

F L Graham, L Prevec Methods Mol Biol 7, 109–128 (1991).

K L Berkner BioTechniques 6, 616–629 (1988).

T Shenk Fields Virology, eds B N Fields, D M Knipe, P M Howley, R M Chanock, J L Melnick, T P Monath, B Roizman, S E Straus (Lippincott, Philadelphia), pp. 2111–2148 (1996).

M S Horwitz Fields Virology, eds B N Fields, D M Knipe, P M Howley, R M Chanock, J L Melnick, T P Monath, B Roizman, S E Straus (Lippincott, Philadelphia), pp. 2149–2171 (1996).

10.1002/j.1460-2075.1985.tb04158.x

10.1126/science.2017680

10.1016/0168-1702(93)90090-A

10.1172/JCI115902

10.1099/0022-1317-36-1-59

10.1016/S0091-679X(08)60603-2

10.1073/pnas.91.13.6186

10.1128/jvi.70.7.4805-4810.1996

10.1073/pnas.94.4.1414

10.1016/0378-1119(92)90691-H

10.1089/hum.1996.7.2-215

10.1016/S0022-2836(83)80284-8

10.1128/mcb.14.2.1333-1346.1994

10.1016/S0091-679X(08)60603-2

10.1016/0092-8674(94)90168-6

10.1146/annurev.ge.29.120195.002453

10.1093/nar/11.17.6003

10.1128/mcb.4.2.302-309.1984

10.1016/S1097-2765(00)80002-7

10.1128/jvi.71.3.1842-1849.1997