Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Một phương pháp đơn giản để phân tích bằng MS/MS các axit amin chưa được tạo este trên các đốm máu khô từ sàng lọc sơ sinh
Tóm tắt
Phân tích bằng khối phổ khối ion hóa điện phun hai chiều đối với các axit amin đã được tạo este butyl hóa và tiêu chuẩn nội chuẩn có đánh dấu đồng vị là quy trình thông thường tại các phòng thí nghiệm sàng lọc sơ sinh trên toàn thế giới. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã thiết lập một phương pháp phân tích trực tiếp với độ chính xác cao hơn sử dụng tiêu chuẩn nội chuẩn không có deuteri. Bộ lấy mẫu tự động và bơm của thiết bị LC đã được sử dụng để tiêm mẫu và pha di chuyển vào khối phổ, nhưng không cần cột LC. Vật liệu đốm máu khô (DBS) được chuẩn bị ở các mức nồng độ thấp, trung bình và cao; thời gian chạy là 1 phút. Song song với quy trình mới, chúng tôi đã áp dụng phương pháp đã được thiết lập để phân tích chín axit amin trên DBS của các trẻ sơ sinh khỏe mạnh và trẻ sơ sinh bị phenylketon niệu. Phương pháp mới được đề xuất của quét xác nhận ion sản phẩm cùng với giám sát phản ứng đa dạng đã dẫn đến việc xác định rất chính xác từng axit amin. Quy trình sáng tạo của chúng tôi có độ nhạy và độ đặc hiệu cao trong việc phân tích các trường hợp nghi ngờ bệnh lý chuyển hóa.
Từ khóa
#phân tích axit amin #khối phổ #sàng lọc sơ sinh #đốm máu khô #tiêu chuẩn nội chuẩn #độ chính xác cao #bệnh lý chuyển hóaTài liệu tham khảo
Chace DH, Kalas TA (2005) A biochemical perspective on the use of tandem mass spectrometry for newborn screening and clinical testing. Clin Biochem 38:296–309
Chace DH, Milhington DS, Terada N, Kahler SG, Roe CR, Hofman LF (1993) Rapid diagnosis of phenylketonuria by quantitative analysis for phenylalanine and tyrosine in neonatal blood spots by tandem mass spectrometry. Clin Chem 39:66–71
Chace DH, Hillman SL, Milhngton DS, Kahier SG, Roe CR, Naylor EW (1995) Rapid diagnosis of maple-syrup-urine-disease in blood spots from newborns by tandem mass-spectrometry. Clin Chem 41:62–68
Chace DH, Adam BW, Jay Smith S, Richard Alexander J, Hillman SL, Harry Hannon W (1999) Validation of accuracy-based amino acid reference materials in dried-blood spots by tandem mass spectrometry for newborn screening assays. Clin Chem 45:1269–1277
Chace DH, Kalas TA, Naylor EW (2003) Use of tandem mass spectrometry for multianalyte screening of dried blood specimens from newborns. Clin Chem 49:1797–1817
Dale Y, Mackey V, Mushi R, Nyanda A, Maleque M, Ike J (2003) Simultaneous measurement of phenylalanine and tyrosine in phenylketonuric plasma and dried blood by high-performance liquid chromatography. J Chromatogr B 788:1–8
De Jesus VR, Chace DH, Lim TH, Mei JV, Harry Hannon W (2010) Comparison of amino acids and acylcarnitines assay methods used in newborn screening assays by tandem mass spectrometry. Clin Chim Acta 411:684–689
Deyl Z, Hyanek J, Horakova M (1986) Profiling of amino acids in body fluids and tissues by means of liquid chromatography. J Chromatogr 379:177–250
Dietzen DJ, Weindel AL (2010) Comprehensive determination of amino acids for diagnosis of inborn errors of metabolism. Methods Mol Biol 603:27–36
Fekkes D (1996) State-of-the-art of high-performance liquid chromatographic analysis of amino acids in physiological samples. J Chromatogr Biomed Appl 682:3–22
Guthrie R, Suzi A (1963) A simple phenylalanine method for detecting phenylketonuria in large populations of newborn infants. Pediatrics 32:338–343
Naylor EW, Guthrie R (1978) Newborn screening for maple syrup urine disease (branched-chain ketoaciduria). Pediatrics 61:262–266
Piraud M, Vianey-Saban C, Petritis K (2003) ESI-MS/MS analysis of underivatised amino acids: a new tool for the diagnosis of inherited disorders of amino acid metabolism. Fragmentation study of 79 molecules of biological interest in positive and negative ionisation mode. Rapid Commun Mass Spectrom 17:1297–1311
Piraud M, Vianey-Saban C, Bourdin C (2005a) A new reversed-phase liquid chromatographic/tandem mass spectrometric method for analysis of underivatised amino acids: evaluation for the diagnosis and the management of inherited disorders of amino acid metabolism. Rapid Commun Mass Spectrom 19:3287–3297
Piraud M, Vianey-Saban C, Petritis K (2005b) Ion-pairing reversed-phase liquid chromatography/electrospray ionization mass spectrometric analysis of 76 underivatized amino acids of biological interest: a new tool for the diagnosis of inherited disorders of amino acid metabolism. Rapid Commun Mass Spectrom 19:1587–1602
Qu Y, Slocum RH, Fu J, Rasmussen WE, Rector HD, Miller JB, Coldwell JG (2001) Quantitative amino acid analysis using a Beckman system gold HPLC 126AA analyzer. Clin Chim Acta 312:153–162
Qu J, Wang YM, Luo GA, Wu ZP, Yang CD (2002) Validated quantitation of underivatized amino acids in human blood samples by volatile ion-pair reversed-phase liquid chromatography coupled to isotope dilution tandem mass spectrometry. Anal Chem 74:2034–2040
Sarwar G, Botting HG (1993) Evaluation of liquid-chromatographic analysis of nutritionally important amino-acids in food and physiological samples. J Chromatogr Biomed Appl 615:1–22
Spackman DH, Stein WH, Moore S (1958) Automatic recording apparatus for use in chromatography of amino acids. Anal Chem 30:1190–1206
Waterval WAH, Scheijen JLJM, Ortmans-Ploemen MMJC (2009) Quantitative UPLC-MS/MS analysis of underivatised amino acids in body fluids is a reliable tool for the diagnosis and follow-up of patients with inborn errors of metabolism. Clin Chim Acta 407:36–42
Zoppa M, Gallo L, Zacchello F, Giordano G (2006) Method for the quantification of underivatized amino acids on dry blood spots from newborn screening by HPLC-ESI-MS/MS. J Chromatogr B 831:267–273
Zytkovicz TH, Fitzgerald EF, Deborah M (2001) Tandem mass spectrometric analysis for amino, organic, and fatty acid disorders in newborn dried blood spots: A two-year summary from the New England newborn screening program. Clin Chem 47:1945–1955