Nội dung được dịch bởi AI, chỉ mang tính chất tham khảo
Phương pháp đơn giản và nhanh chóng để phát hiện Trypanosoma evansi ở lạc đà một bướu bằng cách sử dụng phản ứng chuỗi polymerase nested
Tóm tắt
Một xét nghiệm dựa trên phản ứng chuỗi polymerase nested (nPCR) đã được phát triển và đánh giá để phát hiện nhanh chóng Trypanosoma evansi ở chuột thí nghiệm và lạc đà một bướu (Camelus dromedarius) tự nhiên bị nhiễm bệnh. Bốn mồi oligonucleotide (TE1, TE2, TE3 và TE4) được chọn từ gen lặp đi lặp lại trong nhân của T. evansi, đã được thiết kế và sử dụng cho quá trình khuếch đại PCR. Quá trình khuếch đại đầu tiên, sử dụng một cặp mồi ngoài TE1 và TE2, đã sản xuất một sản phẩm PCR chính có độ dài 821 bp từ DNA của T. evansi. Quá trình khuếch đại thứ hai, sử dụng cặp mồi nested (nội) TE3 và TE4, đã sản xuất một sản phẩm PCR có độ dài 270 bp. DNA của T. evansi được trích xuất từ mẫu máu của chuột thí nghiệm và lạc đà dromedary Sudan bị nhiễm tự nhiên đã được phát hiện bằng xét nghiệm nPCR này. Các mồi nested TE3 và TE4 đã tăng cường độ nhạy của xét nghiệm PCR, và chỉ với 10 fg DNA của T. evansi (tương đương với một bản sao đơn của gen tiềm năng của ký sinh trùng) đã được khuếch đại và quan sát trên gel agarose nhuộm ethidium bromide. Các sản phẩm khuếch đại không được phát hiện khi áp dụng xét nghiệm PCR đối với DNA từ các ký sinh trùng máu khác bao gồm Thieleria annulata, Babesia bigemina hoặc mẫu không chứa axit nucleic. Việc áp dụng xét nghiệm nPCR này vào các mẫu lâm sàng đã dẫn đến việc phát hiện trực tiếp T. evansi từ nhiều mẫu mô được thu thập từ chuột thí nghiệm bị nhiễm bệnh và máu từ lạc đà bị nhiễm tự nhiên. Xét nghiệm nPCR được mô tả cung cấp một công cụ quý giá để nghiên cứu dịch tễ học của sự nhiễm T. evansi ở lạc đà và các quần thể động vật nhạy cảm khác.
Từ khóa
#Trypanosoma evansi #nPCR #lạc đà một bướu #phát hiện nhanh chóng #ký sinh trùngTài liệu tham khảo
Omer RA, Elamin SMM, El Nahas AE, Aradaib IE: PCR for detection of Echinococus granulosus hydatid cysts collected from camels (Camelus dromerarius). The Sudan J of Vet Sci & Anim Husbandry. 2004, 43: 139-143.
Gutierrez G, Juste MC, Corbera JA, Magnus E, Verloo D, Montoya JA: Camel Trypanosomiasis in the Canary Islands: assessment of seroprevalence and infection rates using the card agglutination test (CATT/T. evansi) and parasite tests. Vet Parasitol. 2000, 90: 155-159. 10.1016/S0304-4017(00)00225-9.
Njiru ZK, Constantine CC, Ndung'u JM, Robertsonb I, Okayec S, Thompsona RCA, Reida SA: Detection of Trypanosoma evansi in camels using PCR and CATT/T. evansi tests in Kenya. Vet Parasitolo. 2004, 124: 187-19. 10.1016/j.vetpar.2004.06.029.
Chaudhary ZI, Iqbal MJ: Incidence, biochemical and haematological alterations induced by natural trypanosomosis in racing dromedary camels. Acta Trop. 2000, 77: 209-213. 10.1016/S0001-706X(00)00142-X.
Mahmound MM, Gray AR: Trypanosomosis due to T. evansi (Istell, 1885; Balbiani, 1885). A review of recent research. Trop Anim Health Prod. 1980, 12: 35-47. 10.1007/BF02242629.
Davison HC, Thrusfield MV, Muharsini S, Hussein A, Partoutomo S, Rae PF, Masake R, Luckins AG: Evaluation of antigen and antibody detection tests for Trypanosoma evansi infection of buffaloes in Indonesia. Epidemiol Infect. 1999, 123: 149-155. 10.1017/S0950268899002575.
Reid SA, Copeman DB: The development and validation of an antibody-ELISA to detect Trypanosoma evansi infection in cattle in Australia and Papua New Guinea. Prev Vet Med. 2003, 61: 195-208. 10.1016/j.prevetmed.2003.07.004.
Nantulya VM: Suratex: a simple latex agglutination antigen test for diagnosis of Trypanosoma evansi Suratex: infections (Surra). Trop Med Parasitol. 1994, 45: 9-12.
Viseshakul N, Panyim S: Specific DNA probe for the sensitivity detection of Trypanosoma evansi, Southeast Asian. J Trop Med Public Health. 1990, 21: 21-27.
Moser DR, Cook GA, Ochs DA, Bailey CP, McKane MR, Donelson JE: Detection of Trypanosoma congolense and T. brucei ssp by DNA amplification using the polymerase chain reaction. Parasitolo. 1980, 99: 57-66.
Masiga RC, Nyang'ao JM: Identification of trypanosome species from camel using polymerase chain reaction and procyclic transformation test. Camel Pract Res. 2001, 8: 17-22.
Holland WG, Claes F, My LN, Thanh NJ, Tam PT, Verloo D, Buscher P, Goddeeris B, Vercruysse J: A comparative evaluation of parasitological tests and a PCR for Trypanosoma evansi diagnosis in experimentally infected water buffaloes. Vet Parasitol. 2000, 97: 23-33. 10.1016/S0304-4017(01)00381-8.
Clausen PH, Chuluun S, Sodnomdarjaa R, Greiner M, Noeckler K, Staak C, Zessin KH, Schein E: A field study to estimate the prevalence of Trypanosoma equiperdum in Mongolian horses. Vet Parasitol. 2003, 115: 9-18. 10.1016/S0304-4017(03)00160-2.
Dia ML, Diop C, Aminetou M, Jacquiet P, Thiam A: Some factors affecting the prevalence of Trypanosoma evansi in camels in Mauritania. Vet Parasitol. 1997, 72: 111-120. 10.1016/S0304-4017(97)00054-X.
Diall O, Bocoum Z, Diarra B, Sanogo Y, Coulibaly Z, Waigalo Y: Epidemiology of trypanosomosis caused by T. evansi in camels in Mali: results of parasitological and clinical survey. Rev Elev Med Vet Pays Trop. 1993, 46: 455-461.
Elsaid HM, Nantulya VM, Hilali M: Diagnosis of Trypanosoma evansi infection among Sudanese camels imported to Egypt using card agglutination test (CATT) and antigen detection latex agglutination test (Suratex). J Protozool Res. 1998, 8: 194-200.
Gibson WC, Wilson AL, Moloo SK: Characterization of Trypanosoma (Trypanozoon) T. evansi from camels in Kenya using isoenzyme electrophoresis. Res Vet Sci. 1983, 34: 114-118.
Atarhouch T, Rami M, Bendahman MN, Dakkak A: Camel trypanosomosis in Morocco 1: results of a first epidemiological survey. Vet Parasitol. 2003, 111: 277-286. 10.1016/S0304-4017(02)00382-5.
Omanwar S, Rao JR, Basagoudanavar SH, Singh RK, Butchaiah G: Direct and sensitive detection of Trypanosoma evansi by polymerase chain reaction. Acta Vet Hung. 1999, 47: 351-359. 10.1556/AVet.47.1999.3.9.
Hunter AG: Urine odour in a camel suffering from Surra T. evansi infection. Trop Anim Health Prod. 1986, 18: 146-148. 10.1007/BF02359524.
Borst P, Fowler SF, Gibson WC: Kinetoplast DNA of Trypanosoma evansi. Mol Biochem Parasitol. 1987, 23: 31-38. 10.1016/0166-6851(87)90184-8.
Wuyts N, Chokesajjawatee N, Panyim S: A simplified and highly sensitive detection of Trypanosoma evansi by DNA amplification. S E Asian J Trop Med Publ Health. 1994, 25: 266-271.
Aradaib IE, Abbas AM, Abbas B, Elsanousi SM: Evaluation of conventional methods and nested PCR for detection of paratunerculosis in goats. Vet Res Commun. 2005, 29: 381-383. 10.1007/s11259-005-1433-y.
Artama WT, Agey MW, Danelson JE: DNA comparison of Trypanosoma evansi (Indonesia) and Trypanosoma brucei spp. Parasitology. 1992, 104: 67-74.