Bộ nhuộm acetylcholinesterase nhanh mới để chẩn đoán bệnh Hirschsprung

Pediatric Surgery International - Tập 23 - Trang 505-508 - 2007
Hiroyuki Kobayashi1, Katsumi Miyahara2, Junichi Kusafuka1, Atsuyuki Yamataka1, Geoffrey J. Lane1, Noriyoshi Sueyoshi2, Takeshi Miyano1, Prem Puri3
1Department of Pediatric General and Urogenital Surgery, Juntendo University School of Medicine, Tokyo, Japan
2Division of Biomedical Imaging Research, BioMedical Research Center, Juntendo University School of Medicine, Tokyo, Japan
3Children’s Research Centre, Our Lady’s Hospital for Sick Children, Dublin 4, Ireland

Tóm tắt

Kỹ thuật nhuộm acetylcholinesterase (AChE) truyền thống rất phức tạp và tốn thời gian, đồng thời yêu cầu phải pha trộn các hóa chất độc hại cho cơ thể con người. Chúng tôi đã phát triển một kỹ thuật nhanh cho việc nhuộm AChE, đã được công bố trước đó, và hiện tại giới thiệu một bộ kit để thực hiện nhuộm AChE, đây là một cải tiến hơn nữa. Các mẫu sinh thiết hút trực tràng từ 20 bệnh nhân táo bón và ba mẫu sinh thiết toàn bộ bề mặt từ 4 bệnh nhân mắc bệnh Hirschsprung (HD) trong quá trình phẫu thuật rút ruột từ các đoạn ruột không có hạch, chuyển tiếp và có hạch đã được kiểm tra bằng kỹ thuật nhanh của chúng tôi và bộ kit mới. Mỗi mẫu chỉ cần ủ trong 6 phút. Tất cả các tế bào hạch đều nhuộm rõ ràng AChE chỉ trong 6 phút bằng cả hai kỹ thuật. Tuy nhiên, bộ kit có khả năng nhuộm các sợi thần kinh AChE dương tính một cách rõ ràng hơn và không phát hiện các tế bào histiocyte chứa peroxidase nội sinh, như kỹ thuật nhanh trước đó. Bộ kit cũng có thể phát hiện các sợi thần kinh AChE dương tính trong các lớp cơ tròn và dọc, điều mà kỹ thuật nhanh trước đó không làm được. Bộ kit cho phép thực hiện nhuộm AChE một cách nhanh chóng với độ chính xác hoàn toàn, không có bất kỳ nguy cơ độc hại nào. Hơn nữa, bộ kit cung cấp thông tin tập trung hơn về phân bố AChE trong ruột mà không có sự nhuộm phụ thêm và có thể được sử dụng để chẩn đoán HD và các rối loạn liên quan cũng như xác định chính xác mức độ chi phối cho phẫu thuật cắt ruột rút.

Từ khóa

#acetylcholinesterase #Hirschsprung’s disease #histochemistry #biopsy #nerve fibers #diagnostic kit

Tài liệu tham khảo

Karnovsky MJ, Roots LA (1965) A “direct-coloring” thiocholine method for cholinesterase. J Histochem Cytochem 12:219–2212 Lake BD, Puri P, Nixon HH et al (1978) Hirschsprung’s disease. An appraisal of histochemically demonstrated acetylcholinesterase activity in suction rectal biopsy specimens as an aid to diagnosis. Arch Pathol Lab Med 102:244–247 Hedreen JC, Bacon SJ, Price DL (1985) A modified histochemical technique to visualize acetylcholinesterase-containing axons. J Histochem Cytochem 33:134–1404 Hanker JS, Anderson WA, Bloom FE (1972) Osmiophilic polymer generation: catalysis by transition metal compounds in ultrastructural cytochemistry. Science 175:991–993 Kobayashi H, O’Briain DS, Hirakawa H et al (1994) A rapid technique of acetylcholinesterase staining. Arch Pathol Lab Med 118:1127–1129